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1、目的:多囊卵巢綜合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)是一個(gè)育齡婦女常見(jiàn)的內(nèi)分泌性疾病,發(fā)病率約為5%~10%。臨床特征為月經(jīng)不規(guī)律、卵泡閉鎖、持續(xù)不排卵以及稀發(fā)排卵,并且常常伴隨高的自發(fā)流產(chǎn)率.其發(fā)生機(jī)制仍舊不太明確,是當(dāng)前大家研究的難點(diǎn)和熱點(diǎn)。多數(shù)研究認(rèn)為PCOS是代謝與內(nèi)分泌紊亂的疾病,涉及內(nèi)分泌、代謝、免疫、家族性遺傳等諸多因素。而近年來(lái)越來(lái)越多的研究顯示,基質(zhì)金屬蛋白酶.2和基質(zhì)金屬蛋白酶-9
2、(matrix metallo-oroteinases-2、9,MMP-2、MMP-9)及基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)在多囊卵巢綜合征的發(fā)病機(jī)制中起到極其重要的作用。本研究通過(guò)測(cè)定在我院接受體外受精與胚胎移植(in vitrofertilization-embryo transfer,IVF-ET、)治療的多囊卵巢綜合征患者和月經(jīng)
3、正常因其它原因?qū)嵤┐隧?xiàng)手術(shù)婦女卵泡液里的基質(zhì)金屬蛋白酶-2、9(MMP-2、MMP-9)及基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的水平,探討PCOS患者卵泡閉鎖及高自發(fā)流產(chǎn)率的病因,從而為臨床治療提供理論基礎(chǔ)。 方法 1 研究對(duì)象 1.1 PCOS組(即實(shí)驗(yàn)組):選擇2006年1月.2006年8月在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院生殖中心接受IVF-ET治療的多囊卵巢綜合征患者20例,平均年齡在29.7±5.1歲。
4、 1.2對(duì)照組:隨機(jī)選擇同期在本生殖中心接受IVF-ET治療的不孕婦女20例,為月經(jīng)正常的患者,不孕原因?yàn)檩斅压芤蛩?,且基礎(chǔ)血(月經(jīng)第三天)FSH、LH、E<,2>、PRL、T在正常范圍內(nèi),平均年齡在31±5.52歲。 PCOS組和對(duì)照組的患者均為初次進(jìn)入周期,均行控制超促排卵(COH)治療,COH長(zhǎng)方案:采用促性腺激素釋放激素激動(dòng)劑(GnRH-a/Decapeptyl)、重組卵泡刺激素(Gonal-F)、人絕經(jīng)期促性腺
5、激素(HMG)及人絨毛膜促性腺激素(HcG)超促排卵治療。 2 測(cè)定內(nèi)容及方法 2.1標(biāo)本采集:根據(jù)陰道B超和尿LH試紙半定量及激素LH、E<,2>水平監(jiān)測(cè)卵泡發(fā)育。當(dāng)B超顯示下有一個(gè)卵泡直徑≥18mm,兩個(gè)卵泡直徑≥17mm,或者三個(gè)卵泡直徑≥16mm時(shí),于當(dāng)日21:00給予肌肉注射HCG5000-10000iu,36小時(shí)后在陰道超聲引導(dǎo)下取卵。取卵日,經(jīng)陰道B超測(cè)量各個(gè)卵泡直徑,術(shù)中僅留取直徑=16mm無(wú)血染卵泡液,
6、PCOS患者的同一周期的卵泡液收集在一起,集中離心(2000轉(zhuǎn)/5分鐘,室溫),取上清液置-20℃保存待測(cè)。測(cè)定卵泡液中MMP-2、9,TIMP-1的水平。以同法留取對(duì)照組卵泡液,離心后保存待測(cè)。 2.2標(biāo)本測(cè)定:運(yùn)用ELISA方法測(cè)定卵泡液中MMP-2和MMP-9,TIMP-1的水平. 2.3內(nèi)分泌激素測(cè)定(1)取PCOS組和對(duì)照組月經(jīng)第3天時(shí)的空腹靜脈血,用微粒子化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清中:FSH、E<,2>、LH、T、P
7、RL的水平。(2)取PCOS組和對(duì)照組HCG日的靜脈血測(cè)血清中:E<,2>、LH的水平。 結(jié)果: 1 PCOS組和對(duì)照組內(nèi)分泌激素比較. 1.1月經(jīng)第3天基礎(chǔ)血FSH、E<,2>、LH、T、PRL測(cè)定結(jié)果比較。 1.1.1 PCOS組FSH均值為(5.34±0.72mIU/mi)對(duì)照組FSH均值為(7.12±1.35mlU/ml),比較無(wú)明顯差異性,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 1.1.2 P
8、COS組E2均值為(20.59±3.41pg/ml),對(duì)照組E<,2>均值為(32.09±2.67pg/ml),比較無(wú)明顯差異性,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 1.1.3 PCOS組PRL均值為(13.44±1.79ng/ml)、對(duì)照組PRL均值(14.27±2.16ng/ml),比較無(wú)明顯差異性,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 1.1.4 PCOS組T均值為(0.72±0.11nmol/ml)對(duì)照組T均值為(0.
9、34±0.08nmol/ml),PCOS組高于對(duì)照組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 1.1.5 PCOS組LH均值為(10.89±0.96mIU/ml)對(duì)照組LH均值為(4.68±0.19mlU/ml),PCOS組高于對(duì)照組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 1.1.6 PCOS組LH/FSH比值為2~3,對(duì)照組LH/FSH為0.8~1.1,PCOS組高與對(duì)照組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
10、 1.2 HCG日LH、E<,2>測(cè)定結(jié)果比較 1.2.1 PCOS組LH均值為(10.89±2.31mIU/ml)對(duì)照組LH均值為(8.76±1.74 mlU/ml),比較無(wú)明顯差異性,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05) 。 1.2.2 PCOS組E<,2>均值為(1121.1±119.04pg/ml)對(duì)照組E<,2>均值為(1062±121.4pg/ml)比較無(wú)明顯差異性,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2 P
11、COS組和對(duì)照組間卵泡液中MMP-2、MMP-9、TIMP-1的結(jié)果比較 2.1 MMP-2比較:PCOS組卵泡液中MMP-2均值(52.886±2.9069ng/ml)較對(duì)照組卵泡液中MMP-2均值(39.805±0.8587ng/ml)增高,認(rèn)為兩組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 2.2 MMP-9比較:PCOS組卵泡液中MMP-9均值(47.200±1.4277ng/ml)較對(duì)照組卵泡液中MMP-9均值(
12、37.107±0.7330ng/ml)增高,認(rèn)為兩組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 2.3 TIMP-1比較:PCOS組卵泡液中TIMP-1均值為(37.720±0.3748ng/ml)較對(duì)照組卵泡液中TIMP-1均值(40.942±0.4705ng/ml)降低,認(rèn)為兩組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 3 各指標(biāo)之間的直線相關(guān)關(guān)系 3.1 MMP.2的表達(dá)同TIMP-1的表達(dá)呈負(fù)相關(guān);
13、 3.2 MMP-2的表達(dá)同MMP-9的表達(dá)呈正相關(guān); 3.3 MMP-9的表達(dá)與TIMP-1的表達(dá)呈負(fù)相關(guān); 4 妊娠組婦女(16名)與未妊娠組婦女(24名)卵泡液中MMP-2、MMP-9、TIMP-1的比較 4.1 MMP-2的比較:妊娠組(16名)婦女的卵泡液中MMP-2均值為(42.130±0.4417ng/ml)非妊娠婦女組(24名)卵泡液中MMP-2均值為(41.336±0.9201ng/ml)
14、,沒(méi)有有顯著差異性,認(rèn)為兩組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 4.2 MMP-9的比較:妊娠組(16名)婦女的卵泡液中MMP-9均值為(43.357±0.5762ng/ml)非妊娠婦女組(24名)卵泡液中MMP-9均值為(41.879±0.8276ng/ml),沒(méi)有顯著差異性,認(rèn)為兩組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 4.3 TIMP-1的比較:妊娠組(16名)婦女的卵泡液中TIMP-1均值為(38.572±0.
15、6753ng/ml)非妊娠婦女組(24名)卵泡液中TIMP-1均值為(38.796±0.7627ng/ml),沒(méi)有顯著差異性,認(rèn)為兩組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論 1 PCOS組內(nèi)分泌基礎(chǔ)血LH、T、LH/FSH比值水平均高于對(duì)照組,而FSH、PRL、E<,2>無(wú)明顯差異性,而HCG日PCOS組和對(duì)照組血LH、E<,2>無(wú)明顯差異性,沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2 在相同的條件下,PCOS患者卵泡液中的MM
16、P-2、MMP-9的水平明顯高于對(duì)照組,而PCOS患者卵泡液中TIMP-1的水平低于于對(duì)照組。提示:MMP-2、9在多囊卵巢綜合征患者中的水平增高,TIMP-1水平降低,由此我們可以推斷其與PCOS患者卵泡過(guò)早閉鎖及高自發(fā)流產(chǎn)率相關(guān),這個(gè)結(jié)論對(duì)PCOS患者懷孕后適當(dāng)?shù)难a(bǔ)充孕激素可以減少自發(fā)流產(chǎn)率提供了理論基礎(chǔ)。 3 MMP-2、MMP-9的表達(dá)同TIMP-1的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),MMP-2表達(dá)同MMP-9呈正相關(guān)。 4 在妊
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