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文檔簡介
1、類風濕性關節(jié)炎(RA)是一種以關節(jié)滑膜炎為特征的慢性全身性自身免疫性疾病,類似于“局限性惡性腫瘤”的增生性和破壞性病變,呈進行性發(fā)展,晚期由于關節(jié)軟骨及骨的破壞而導致關節(jié)畸形和功能障礙。該疾病在我國的發(fā)病率約為0.34~0.36%。此病迄今發(fā)病機制未能完全闡明。 近年來眾多學者認為基質金屬蛋白酶(MMPs)與RA發(fā)病之間有著密切聯(lián)系。MMPs是一類以Zn<'2+>為輔助因子的蛋白酶家族,在體內主要降解細胞外基質(ECM),是調節(jié)
2、ECM動態(tài)平衡的最重要的一大酶系。MMPs可降解RA的關節(jié)軟骨與骨中的膠原,蛋白多糖及其他的細胞外基質大分子,促進血管翳對軟骨的侵襲。而RA關節(jié)的損傷主要來源于增生的血管翳對于關節(jié)軟骨的侵襲。造成累及周身關節(jié)的增生性和侵蝕性滑膜炎。目前為止已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了二十余種MMP,其中,MMP-2與MMP-9同屬于MMPs家族的明膠酶類,它們可以溶解明膠、Ⅰ型、Ⅳ型、Ⅴ型和Ⅸ型膠原以及粘合素,而這些成分也是關節(jié)軟骨的重要組成成分,故而MmP-2和MMP
3、-9和RA的發(fā)病機制有關?;|金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMPs)是MMP的天然抑制劑,為一組可抑制MMP活性的多功能因子,它們在多個環(huán)節(jié)抑制MMP的活性,防止ECM的降解。在RA中,TIMPs為了保持被MMPs打破的ECM的平衡,在表達水平上亦會做出變化。TIMPs可分為四類,TIMP-1是其中的一種,TIMP-1能抑制絕大多數(shù)的MMP,但主要為MMP-9的特異性抑制劑,其可與MMP-9前體形成高度親和的、非共價鍵結合的復合物。MMP-
4、2、MMP-9和TIMP-1在RA中的表達有待研究。 目的: 觀察MMP-2、MMP-9和TIMP-1在RA滑膜被覆細胞以及滑膜下組織中的表達狀況,探討MMP-2、MMP-9和TIMP-1在RA發(fā)病中的作用機理。 材料與方法: (1)本研究選取了天津市天津醫(yī)院2004年1月至2006年10月經(jīng)病理學確診的RA病例手術切除滑膜標本65例作為實驗組:其中女性患者43例,年齡17~70歲,平均年齡37±0.12
5、歲,發(fā)病部位:膝關節(jié)34例,髖關節(jié)2例,肘關節(jié)3例,踝關節(jié)3例,腕關節(jié)1例;男性患者22例,年齡12~71歲,平均年齡39±0.10歲,部位:膝關節(jié)17例,髖關節(jié)2例,踝關節(jié)2例,腕關節(jié)1例。另外選取10例骨性關節(jié)炎(OA)滑膜和7例大致正?;そM織(半月板損傷三天之內手術標本,年齡11~35歲,平均年齡22±0.20歲)作為對照組。 (2)所有標本均經(jīng)10%福爾馬林固定,梯度酒精脫水,二甲苯透明,浸蠟,石蠟包埋后行5μm連續(xù)切
6、片,分別進行HE染色,采用兔抗人MMP-2,MMP-9和TIMP-1多克隆抗體進行免疫組織化學染色。 (3)在光學顯微鏡下進行觀察:對RA組、OA組和大致正?;そMMMP-2、MMP-9以及TIMP-1的陽性細胞判定標準為,每例隨機選取10個高倍視野,計數(shù)每個視野網(wǎng)格測微尺內陽性細胞個數(shù),10個視野陽性細胞總數(shù)/10得出每例陽性細胞均數(shù),<10為陰性(-);11~25為(+);26~50為(++):≥51為(+++)。用上述方法
7、,對RA組中的滑膜被覆細胞和滑膜下組織中的陽性細胞進行計數(shù),標準同上。 (4)數(shù)據(jù)處理:采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計分析。MMP-2,MMP-9以及TIMP-1在RA組與OA和大致正?;そM的表達比較采用兩樣本比較的秩和檢驗。MMP-2,MMP-9以及TIMP-1在RA組的滑膜被覆細胞和滑膜下組織中的表達采用兩樣本比較的秩和檢驗。評價MMP-2、MMP-9以及TIMP-1之間的表達相關性,采用Spearman等級相關進
8、行檢驗。 結論: (1)RA患者MMP-2、MMP-9以及TIMP-1的陽性表達率明顯高于OA組和大致正常滑膜組。因此推斷MMP-2、WMP-9以及TIMP-1在RA的發(fā)病機制中發(fā)揮作用。 (2)MMP-2、MMP-9以及TIMP-1在RA滑膜被覆細胞和滑膜下組織的陽性表達率不同,表明RA的不同組織部位的MMPs和TIMP的表達有差異。 (3)MMP-9和TIMP-1的陽性表達有顯著相關性,推斷可能是因為
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