HIF-1α經(jīng)β-catenin激活WNT通路對缺氧胃癌細胞增殖的影響.pdf

1、目的:探討缺氧環(huán)境下缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)、β-連環(huán)蛋白(β-catenin)與Wnt信號通路之間的關系及胰島素樣生長因子Ⅱ mRNA結合蛋白3(IMP3)和增殖細胞核抗原(PCNA)在胃癌SGC-7901細胞增殖中的作用。
　　方法:使用RNAi技術，建立靶向干擾β-catenin的質粒。將pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-β-catenin質粒轉染至人胃癌細胞株SGC-7091，建立穩(wěn)定轉染細胞株mi

2、R-β-catenin-7901。實驗分成對照組、缺氧組、干擾組和缺氧干擾組，采用平板克隆形成實驗和細胞倍增時間檢測各組SGC-7901細胞的增殖情況，蛋白質印跡法檢測各組SGC-7901細胞中HIF-1α、β-catenin、IMP3和PCNA蛋白的表達水平。
　　結果:與對照組比較，缺氧組細胞的平板克隆形成數(shù)增多、倍增時間縮短(P＜0.05);與缺氧組比較，缺氧干擾組細胞平板克隆形成數(shù)減少、倍增時間延長(P＜0.05)。缺氧組

3、細胞中HIF-1α、β-連環(huán)蛋白、IMP3和PCNA蛋白表達水平均高于對照組(P＜0.05);干擾組細胞中HIF-1α、β-catenin、IMP3和PCNA蛋白表達水平低于對照組(P＜0.05);缺氧干擾組細胞中HIF-1α、β-catenin、IMP3和PCNA蛋白表達水平低于缺氧組(P＜0.05)。
　　結論:1）靶向干擾β-catenin的穩(wěn)定轉染細胞株miR-β-catenin-7901建立成功。2）缺氧條件下，胃癌細胞