孕期缺氧對青年子代認知功能及海馬NMDAR-Wnt-Catenin通路的影響.pdf

1、第一部分孕期缺氧對青年子代腦發(fā)育及學習記憶等認知功能的影響
　　目的：孕期缺氧可以導致胎兒出生后以至于成年時期出現(xiàn)各種生理病理的改變，對某些成人疾?。ˋdult diseases）或慢性疾病的易感性增加。本研究探討孕期缺氧對胚胎期以及青年子代腦發(fā)育及功能的長期影響。
　　方法：采用本實驗室已建立成熟的孕期缺氧模型，將懷孕母鼠隨機分為孕期缺氧組（缺氧組，PH）和常氧組（對照組，Con）。孕期缺氧組母鼠（妊娠第4-21天）放置于

2、10.5％缺氧箱中，對照組母鼠（妊娠第4-21天）放置于21%常氧箱中，出生后子代鼠均在常氧環(huán)境下飼養(yǎng)。分別稱量胎鼠、6周齡大鼠的體重、腦重。采用Morris水迷宮實驗檢測6周齡子代大鼠的空間學習記憶能力。
　　結(jié)果：孕期缺氧組胎鼠腦重及體重均明顯低于常氧對照組；孕期缺氧組6周齡子代大鼠腦重明顯低于常氧對照組，而體重并無明顯差異。Morris水迷宮實驗結(jié)果顯示，兩組6周齡子代大鼠之間游泳速度無明顯差異，孕期缺氧子代大鼠在定位航行實

3、驗中需要更長的時間才能找到平臺；在空間搜索實驗中的穿越平臺次數(shù)明顯低于常氧對照組。
　　結(jié)論：孕期缺氧不僅直接影響胎兒的生長和腦發(fā)育，而且其產(chǎn)生的不良效應可持續(xù)到子代青年期，導致青年子代學習記憶等認知能力下降。
　　第二部分孕期缺氧對青年子代海馬NMDAR-Wnt-Catenin通路的影響
　　目的：通過分子生物學手段，研究孕期缺氧對子代海馬NMDAR-Wnt-Catenin通路的影響。
　　方法：孕期缺氧模型的

4、建立同第一部分；取6周齡子代大鼠的新鮮海馬組織，以熒光定量PCR、Western blot方法檢測海馬組織內(nèi)NMDAR-Wnt-Catenin通路相關基因（Grin1、Grin2a、Grin2b、Wnt2、Wnt3a、Wnt5a、Wnt7a、β-catenin、Fosl1）及蛋白（NR1、NR2A、NR2B、β-catenin、活化的β-catenin）的表達。
　　結(jié)果：熒光定量PCR結(jié)果顯示，與對照組相比，缺氧組6周齡子代大鼠

5、海馬NMDAR相關基因Grin1、Grin2a、Grin2b均下降，其中以Grin2a下降最為明顯；Wnt通路相關基因Wnt3a明顯下降，但Wnt通路主要受體Fzd4以及LRP5/6無明顯變化、β-catenin有下降趨勢、β-catenin的下游基因Fosl1明顯下降。Western blot結(jié)果顯示，缺氧組6周齡子代鼠海馬組織內(nèi)的NR1、NR2A、NR2B、活化的β-catenin的蛋白表達量均顯著低于對照組，總的β-catenin