特異性靶向晚期糖基化終產(chǎn)物受體(RAGE)的siRNA降低人類(lèi)乳腺癌增殖研究.pdf

1、背景:晚期糖基化終產(chǎn)物受體(RAGE)在多種人類(lèi)癌細(xì)胞中高水平表達(dá);然而，它在乳腺癌發(fā)生和增殖過(guò)程中的作用尚不清楚。
　　目的:本研究探討了RAGE對(duì)于乳腺癌的生物學(xué)行為變化的影響。
　　方法:本研究分為體外和體內(nèi)研究?jī)蓚€(gè)部分。體外研究中，選擇乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231（三陰性）、SK-Br-3（HER2陽(yáng)性）和MCF-7（ER陽(yáng)性）作為研究對(duì)象，靶向RAGE的siRNA可降低這三種細(xì)胞系中RAGE基因的表達(dá)。實(shí)時(shí)熒光

2、定量PCR和Western blot檢測(cè)RAGE，NF-κB P65，Cyclin D1和PCNA的表達(dá)。MTT法和細(xì)胞周期分析法探討了RAGE敲低對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響。另一方面，在體內(nèi)研究中，通過(guò)將21只裸鼠隨機(jī)分為六組:分別為RAGE-siRNA組、RAGE-siRNA+Doxorubicin組、Negative RNA+ Doxorubicin組、Doxorubicin組、Negative siRNA組以及空白對(duì)照組，通過(guò)

3、游標(biāo)卡尺測(cè)量、生物發(fā)光成像(BLI)和磁共振成像(MRI)監(jiān)測(cè)移植至裸鼠體內(nèi)的腫瘤生長(zhǎng)情況。隨后通過(guò)免疫組化(IHC)分析腫瘤樣本中RAGE，PCNA，CyclinD1和NF-κB p65的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:我們發(fā)現(xiàn)RAGE的表達(dá)水平與乳腺癌的嚴(yán)重程度相關(guān)。此外，下調(diào)RAGE表達(dá)可以使體外培養(yǎng)的三種乳腺癌細(xì)胞系(MDA-MB-231，SK-Br-3和MCF-7)的增殖水平下降并且可抑制移植到裸鼠體內(nèi)的腫瘤生長(zhǎng)。靶向RAGE的s

4、iRNA可將細(xì)胞阻滯在G1期并且抑制DNA的合成(P＜0.05)。此外，實(shí)時(shí)熒光定量PCR，Western blot和免疫組化結(jié)果顯示，靶向RAGE的siRNA可降低核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB p65、細(xì)胞增殖標(biāo)記PCNA和CyclinD1的表達(dá)。
　　結(jié)論:RAGE可在三種乳腺癌亞型特別是侵襲性強(qiáng)的三陰性亞型乳腺癌細(xì)胞中過(guò)表達(dá)。RAGE表達(dá)下調(diào)的細(xì)胞，其增殖能力下降并且能顯著性地抑制腫瘤的生長(zhǎng)。然而，RAGE敲低并不能提高腫瘤對(duì)阿霉素