TIE2配體寡肽的設(shè)計、篩選及其在基因治療中的靶向?qū)胱饔?pdf

1、腫瘤基因治療將成為除手術(shù)、放療和化療等方法外又一新的抗癌策略.尤其在抗腫瘤轉(zhuǎn)移和復發(fā)方面將起重要作用.目前還缺乏將基因?qū)肴梭w細胞的高效靶向性載體系統(tǒng),這是基因治療至今尚未成為臨床常規(guī)治療措施的關(guān)鍵因素之一.因此研發(fā)一種高效靶向性基因?qū)胂到y(tǒng)成為當務(wù)之急.該研究旨在建立一種靶向Tie2受體的非病毒基因?qū)胂到y(tǒng)并檢驗其有效性,為今后腫瘤的基因治療提供可靠的理論依據(jù)與實踐指導.第一部分 Tie2配體寡肽的設(shè)計與篩選;目的:掌握特定受體的配體

2、寡肽的設(shè)計與篩選方法;獲得Tie2受體的候選配體寡肽;第二部分 GA3、GA4和GA5與Tie2在體內(nèi)及體外特異性結(jié)合試驗;目的:檢測GA3、GA4和GA5與Tie2在體內(nèi)和體外特異性結(jié)合能力;方法:<'125>I標記GA3、GA4和GA5,然后分別在SMMC7721-Ex Tie2細胞及Tie2表達陽性的肺腺癌SPC-A1細胞裸鼠種植瘤中進行體外、體內(nèi)結(jié)合試驗,采用競爭法檢測結(jié)合特異性.第三部分 GA3和GA5基因?qū)胂到y(tǒng)的構(gòu)建及其轉(zhuǎn)

3、導報告基因的體外與體內(nèi)靶向?qū)朐囼?目的:構(gòu)建GA3和GA5基因?qū)胂到y(tǒng)并檢測其轉(zhuǎn)運基因的靶向性.第四部分 GA3和GA5基因?qū)胂到y(tǒng)轉(zhuǎn)導p53基因的體內(nèi)靶向性基因治療試驗;目的:檢測GA3和GA5基因?qū)胂到y(tǒng)轉(zhuǎn)導p53基因的體內(nèi)靶向性基因治療效果,為基因治療的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù).方法:該實驗采用4周齡雌性裸數(shù)鼠(BALB/c).人肺癌SPC-A1種植瘤接種于裸鼠皮下,當種瘤直徑達0.4-0.5cm時,挑選腫瘤大小均勻的動物隨機分為7