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文檔簡介
1、目的:建立對氧磷酶1(PON1)有機磷脂酶及芳香酯酶活性雙試劑、可見光波長比色的檢測方法,滿足PON1兩種酶活性的臨床全自動檢測,并探討其在穩(wěn)定性冠狀動脈疾?。⊿CAD)中的應(yīng)用價值,
方法:設(shè)計可見光波長底物建立PON1有機磷脂酶及芳香酯酶活性雙試劑檢測方法并對該檢測方法進行分析性能評估。收集臨床經(jīng)篩選的初發(fā)穩(wěn)定性冠脈疾病的樣本130例,用新建立的檢測方法檢測PON1有機磷脂酶和芳香酯酶的活性,分析PON1兩種酶活性在SCA
2、D診斷及危險分層中的作用。
結(jié)果:成功建立了PON1有機磷脂酶及芳香酯酶全自動檢測方法。PON1有機磷脂酶系統(tǒng)的分析性能檢測如下:檢測限為28.3 U/L;檢測線性范圍為49.5~668.0 U/L;可報告范圍可達39.0~668.0 U/L;PON1有機磷脂酶活性在259.2 U/L和407.0 U/L的低、高值水平處批內(nèi)精密度分別為1.2%和0.7%,批間精密度分別為2.8%和2.4%;且在血紅蛋白濃度≤1.0 g/L、膽
3、紅素≤200μmol/L、脂肪乳≤2.0%時無干擾;檢測335例健康成人血清PON1有機磷脂酶活性,參考區(qū)間為169.0~574.1 U/L。PON1芳香酯酶系統(tǒng)的分析性能檢測如下:檢測限為33.1 U/L;檢測線性范圍為47.9~355.8 U/L;可報告范圍可達47.9~387.6 U/L;PON1芳香酯酶活性為166.4 U/L和364.5 U/L的低、高值水平處批內(nèi)精密度分別為0.9%和0.5%,批間精密度分別為2.4%和2.0
4、%;且在血紅蛋白濃度≤2.0 g/L、膽紅素≤100μmol/L、脂肪乳≤1.0%時無干擾;檢測335例健康成人血清PON1芳香酯酶活性,參考區(qū)間為119.0~374.1 U/L。而穩(wěn)定性冠脈綜合癥的患者兩種酶活性(PON1有機磷脂酶活性:287.9±95.0 U/L,PON1芳香酯酶活性:184.5±30.9 U/L)與健康人對照組(PON1有機磷脂酶活性:365.6±69.6 U/L,PON1芳香酯酶活性:208.3±23.4 U/
5、L)相比顯著下降(P<0.05),且冠脈重度狹窄的患者比輕度狹窄的患者的芳香酯酶活性下降顯著(重度狹窄:171.8±23.9 U/L,輕度狹窄:209.5±27.7 U/L,P<0.05)。研究還表明PON1有機磷脂酶及芳香酯酶與高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的聯(lián)合檢測提高了SCAD的診斷靈敏度及特異性。
結(jié)論:本研究成功建立了PON1有機磷脂及PON1芳香酯酶活性的全自動檢測方法,實現(xiàn)了PON1有機磷脂酶及芳香酯酶兩種酶活
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