新型ALN-HA-CS支架材料對BMSCs成軟骨分化的影響.pdf

1、本文以新型阿侖膦酸鈉-羥基磷灰石-殼聚糖(Alendronate-hydroxyapatite-chitosan，ALN/HA/CS)軟骨支架材料為支撐，與兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone marrow-derived mesenchymal stem cells、BMSCs)共培養(yǎng)，檢測培養(yǎng)后不同時間成軟骨分化的基因表達(dá)，從而評估ALN/HA/CS對BMSCs分化的影響。
　　本研究進(jìn)行了幼兔BMSCs的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)，經(jīng)傳代后

2、接種于含有ALN/HA/CS雙層復(fù)合支架材料的細(xì)胞培養(yǎng)板中進(jìn)行體外培養(yǎng)，對照組為HA/CS雙層復(fù)合支架材料。在培養(yǎng)后不同時間收集細(xì)胞進(jìn)行實時定量PCR檢測ALP、二型膠原與一型膠原等與軟骨形成相關(guān)基因表達(dá)和糖胺聚糖分泌。得到如下結(jié)果:1.成骨誘導(dǎo)3、5、7天，實驗組ALP基因表達(dá)水平均明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。成骨誘導(dǎo)7、14、21天，實驗組BGP基因表達(dá)均明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。2

3、.成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)3、6、12天時，實驗組與對照組二型膠原基因表達(dá)量與糖氨基聚糖(GAG)分泌量均無明顯區(qū)別。成軟骨誘導(dǎo)3天，實驗組與對照組一型膠原基因表達(dá)無顯著差異，成軟骨誘導(dǎo)6、12天，一型膠原在實驗組的表達(dá)水平均明顯低于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。3.在實驗組，成軟骨誘導(dǎo)3、6、12天時，一型膠原表達(dá)無明顯區(qū)別。在對照組，成軟骨誘導(dǎo)6天與3天相比，一型膠原表達(dá)增加，在誘導(dǎo)12天與誘導(dǎo)6天相比，一型膠原表達(dá)增加，差異具