人季節(jié)性流感病毒H3N2小鼠適應(yīng)株的建立及分子機(jī)制的初步探究.pdf

1、流感病毒屬正黏病毒科，為單負(fù)鏈RNA病毒，根據(jù)流感病毒的核蛋白和基質(zhì)蛋白，可以將流感病毒分為甲、乙、丙三個(gè)型，另外，甲型流感病毒還可以根據(jù)其病毒顆粒表面的血凝素和神經(jīng)氨酸酶分為不同的亞型。流感自1918年大流行進(jìn)入人們視野以來，在二十世紀(jì)的肆虐給人類社會(huì)帶來了巨大的生命財(cái)產(chǎn)損失和公共衛(wèi)生壓力。進(jìn)入二十一世紀(jì)，隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，人類并不能扼制住流感病毒的肆虐，二十一世紀(jì)前十年高致病性人禽流感的爆發(fā)、2009年墨西哥新型H1N1流感的大流

2、行，已經(jīng)成為全世界公共衛(wèi)生安全的重要威脅。
　　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是一種研究流感病毒的重要工具，其在流感病毒的致病機(jī)理、免疫反應(yīng)、藥物和疫苗評(píng)價(jià)等方面提供了重要的幫助。目前針對(duì)流感病毒的動(dòng)物模型主要有:雪貂、豬、小鼠、非人靈長類等，每種動(dòng)物模型都有其自身的優(yōu)勢(shì)和缺點(diǎn)存在。BALB/c小鼠以其自身體積小、易飼養(yǎng)，在感染流感病毒后，能在臨床上和肺部病理變化上產(chǎn)生與人感染流感后較為相似的癥狀，因此BALB/c小鼠成為了研究流感病毒比較普遍的選擇。

3、但是由于人流感病毒并不能天然的感染BALB/c小鼠，因此需要使人流感病毒在BALB/c小鼠上進(jìn)行連續(xù)的傳代，以得到適應(yīng)小鼠的流感病毒株。
　　本實(shí)驗(yàn)選擇了人季節(jié)性流感病毒influenza A virus(A/Hong Kong/1968(H3N2))，使用滴鼻的方式在BALB/c小鼠體內(nèi)進(jìn)行連續(xù)傳8代后，通過對(duì)小鼠的臨床觀察、病毒載量的測(cè)定、病毒滴度的測(cè)定、肺部病理改變的觀察、細(xì)胞因子檢測(cè)等手段，得出在病毒與小鼠肺中連續(xù)傳代的過

4、程中，病毒毒力逐漸加強(qiáng)，鼠肺中病毒載量提高了將近4個(gè)數(shù)量級(jí)，病毒滴度上升了2.51gCCID50，在選取的有代表性的適應(yīng)代次在細(xì)胞上的增殖曲線試驗(yàn)中同樣證明了流感病毒在適應(yīng)小鼠的過程中，毒力得到了加強(qiáng)。
　　同時(shí)，小鼠肺部的病理改變隨病毒代次的增加而愈發(fā)嚴(yán)重，至第七代病毒感染的小鼠，肺部出現(xiàn)大面積的出血、肺部結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞，隨著病毒適應(yīng)代次的增加，能引起小鼠肺部更強(qiáng)烈的病變。另外，對(duì)流感病毒第四節(jié)段（編碼HA蛋白）和第六節(jié)段（編碼N