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文檔簡介
1、目的:為降低多發(fā)脂肪瘤吸除術(shù)后復(fù)發(fā)并為臨床實踐提供理論依據(jù),將脂肪瘤吸除術(shù)終末質(zhì)硬腫瘤組織,用干細胞標記抗體通過免疫組織化學(xué)方法標記干細胞,比較脂肪瘤吸除術(shù)終末質(zhì)硬腫瘤組織與正常脂肪組織中干細胞的密度和面積,確定脂肪瘤吸除術(shù)中終末質(zhì)硬腫瘤組織的性質(zhì),初步探討脂肪瘤吸除術(shù)終末質(zhì)硬腫瘤組織在脂肪瘤吸除術(shù)后復(fù)發(fā)中的作用。
方法:
1、采用脂肪瘤吸除術(shù)以及傳統(tǒng)外科手術(shù)切除脂肪瘤的方法治療河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院整形外科多
2、發(fā)性脂肪瘤患者2例共28個脂肪瘤,獲得脂肪瘤吸除術(shù)終末質(zhì)硬腫瘤組織標本28份;從脂肪瘤周邊獲取正常脂肪組織18份,標本分別用4%福爾馬林固定72小時,修整、脫水后石蠟包埋。
2、對2種組織標本分別進行8μm連續(xù)切片,常規(guī)HE染色,進行病理檢查,脫水封片,觀察2種組織的病理學(xué)差異,并采集圖像。
3、對2種組織分別進行8μm連續(xù)切片,干細胞標記抗體CD29、CD34、CD44對脂肪組織組織干細胞進行免疫組化染色,
3、取陽性細胞進行統(tǒng)計學(xué)分析,細胞膜及細胞漿呈棕黃色著色的細胞為陽性細胞。
4、采用SPSS16.0對陽性細胞密度、陽性細胞面積進行t'檢驗。
結(jié)果:
1、大體病理脂肪瘤吸除術(shù)中終末質(zhì)硬腫瘤組織質(zhì)地中等硬度,中央顏色微黃,周邊散在灰白色質(zhì)地疏松、不規(guī)則、條梭狀膜樣組織(附Fig2);正常脂肪組織顏色微黃,質(zhì)地柔軟均勻,無質(zhì)硬結(jié)節(jié)存在。
2、HE染色脂肪瘤吸除術(shù)中終末質(zhì)硬腫瘤組織有較多的
4、間質(zhì)成份,間質(zhì)中富于成纖維細胞樣細胞,成簇分布于脂肪細胞之間,分布無明顯規(guī)律,細胞核藍染,包漿較少;正常脂肪組織,脂肪細胞呈圓形或多邊形,大小一致,形態(tài)均一,間質(zhì)較少,脂肪細胞之間可見少量成纖維細胞樣細胞。脂肪瘤吸除術(shù)中終末質(zhì)硬腫瘤組織與脂肪組織之間的成纖維細胞樣細胞存在明顯存在數(shù)量差別;正常組織中脂肪細胞分化更為成熟(Fig7,8)。
3、免疫組織化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)脂肪瘤吸除術(shù)中終末質(zhì)硬腫瘤組織和脂肪組織中紡錘形、成纖維細胞樣
5、細胞(Fig9-14)被干細胞標記抗體(CD29、CD34、CD44)標記。
4、統(tǒng)計學(xué)分析各組被干細胞標記抗體標記的陽性細胞密度(陽性細胞密度=陽性細胞數(shù)/統(tǒng)計場面積0.48mm2),陽性細胞面積。
4.1抗CD29標記的脂肪瘤吸除術(shù)中終末質(zhì)硬腫瘤組織、脂肪組織陽性細胞平均密度分別為410±177個/mm2、74±17個/mm2,陽性細胞平均面積分別為(1.47±0.72)×10-2mm2、(0.42±0.
6、07)×10-2mm2(Tab.1)。
4.2抗CD34標記的終末質(zhì)硬腫瘤組織、脂肪組織陽性細胞密度分別為436±157個/mm2、136±31個/mm2,陽性細胞平均面積分別為(1.53±0.68)×10-2mm2、(0.59±0.10)×10-2mm2(Tab.2)。
4.3抗CD44標記的脂肪瘤吸除術(shù)中終末質(zhì)硬腫瘤組織、脂肪組織平均陽性細胞密度分別為468±200個/mm2、80±17個/mm2,平均陽
7、性細胞面積分別為(1.49±0.73)×10-2mm2、(0.53±0.18)×10-2mmm2(Tab.3)。
5、對各組標本陽性細胞密度、陽性細胞面積進行統(tǒng)計學(xué)分析,進行兩獨立樣本的t'檢驗。
5.1干細胞標記抗體標記兩組標本陽性細胞密度統(tǒng)計量分別為:t'CD29=9.936,P<0.01;t'CD34=9.787,P<0.01,t'CD44=10.17,P<0.01。脂肪瘤吸除術(shù)中終末質(zhì)硬腫瘤組織與脂肪
8、組織之間CD29、CD34、CD44陽性細胞平均密度按α=0.05水準存在統(tǒng)計學(xué)差異(Tab.4)。
5.2干細胞標記抗體標記兩組標本陽性細胞面積統(tǒng)計量分別為:t'cm9=7.61,P<0.05;t'cD34=11.706,P<0.01;t'CD44=6.641,P<0.01。脂肪瘤吸除術(shù)中終末質(zhì)硬腫瘤組織與脂肪組織之間CD29、CD34、CD44陽性細胞面積按α=0.05水準存在統(tǒng)計學(xué)差異(Tab.4)。
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