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文檔簡介
1、目的:前言腦缺血再灌注損傷時神經(jīng)細胞死亡除壞死外,還存在另一種形式--細胞凋亡,且在缺血再灌注損傷中起著重要的作用.該研究采用大鼠大腦中動脈缺血再灌注模型,經(jīng)側腦室注射質(zhì)粒pLXSN介導人bcl-2 cDNA后,觀察腦梗死體積、bcl-2及ICAM-1表達的同時,證實bcl-2的神經(jīng)保護作用,探討bcl-2與ICAM-1之間的關系.材料與方法健康Wistar大鼠135只,體重250-300g,按隨機排列表隨機分為三組:生理鹽水組、空質(zhì)粒
2、組和bcl-2組,每組45只,每組在缺血2小時再灌注3、6、24、48、72小時5個時間點又隨機分為5個亞組,每亞組9只.采用改良線栓法制備右側大腦中動脈閉塞(MCAO)模型,然后立即將大鼠固定在腦立體定位儀上,應用立體定向技術向側腦室內(nèi)分別注射生理鹽水、質(zhì)粒pLXSN及pLXSN-bcl-2,MCAO制備成功的大鼠于缺血后2小時進行再灌注.每亞組各取5只大鼠,分別于相應的缺血再灌注時間點(3h、6h、24h、48h、72h)直接斷頭取
3、腦,采用TTC染色,應用顯微圖象分析系統(tǒng)采集并分析腦梗死面積,按梯形法計算腦梗死體積.每亞組各取4只大鼠分別于相應的缺血再灌注后3、6、24、48、72h灌注取腦,常規(guī)固定,石蠟包埋,制成石蠟切片后,采用免疫組織化學方法分別進行bcl-2和ICAM-1免疫組化染色,應用顯微圖象分析系統(tǒng)采集并分析圖象,觀察bcl-2及ICAM-1的表達.各組數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示,組間差異分析方法采用t檢驗,p<0.05認為有統(tǒng)計學意義.結論經(jīng)側腦室注射
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