痛絡(luò)活血方對(duì)UUO大鼠腎臟HIF-1α、PDGF及VCAM-1蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的:觀察大鼠血清尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)、白蛋白(ALB)、腎組織中缺氧誘導(dǎo)因子1(HIF-1α)、血小板源性生長因子(PDGF)、血管細(xì)胞粘附分子1（VCAM-1）表達(dá)變化，探討通絡(luò)活血方對(duì)以上觀察指標(biāo)的干預(yù)作用，進(jìn)一步研究通絡(luò)活血方干預(yù)腎間質(zhì)纖維化的分子生物學(xué)作用機(jī)制。
　　 方法:將60只清潔級(jí)SpragueDawley(SD)大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（24只）、模型組（24只）、通絡(luò)活血方組（24只）、氯沙坦對(duì)

2、照組（以下簡(jiǎn)稱氯沙坦組）（24只），除假手術(shù)組外其余各組大鼠均采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎的方法建立腎間質(zhì)纖維化大鼠模型;氯沙坦組和通絡(luò)活血方組分別于術(shù)后第一天予氯沙坦和通絡(luò)活血方（黃芪10g、當(dāng)歸10g、丹參10g、大黃6g、紅花6g、田七3g）灌胃，假手術(shù)組和模型組灌服同體積的生理鹽水，并以UUO術(shù)后7、14、21天作為觀察點(diǎn)，稱重后分別處死各組大鼠各8只。采用二乙酰-肟法觀察模型大鼠BUN的變化，采用苦味酸法觀察模型大鼠Scr的變化;采用組

3、織病理學(xué)（HE、Masson染色）方法，觀察大鼠腎組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的病理變化，評(píng)價(jià)各組各時(shí)間點(diǎn)腎間質(zhì)損傷程度;采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)各組大鼠腎組織HIF-1α、PDGF、VCAM-1蛋白的表達(dá)趨勢(shì);采用SPSS21.0軟件對(duì)以上指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果:
　　 (1)各組大鼠的一般情況比較:假手術(shù)組大鼠體重增長正常，精神狀況良好，飲食正常，動(dòng)作自如，反應(yīng)靈敏，皮毛柔順有光澤;模型組大鼠術(shù)后7天開始逐漸出現(xiàn)飲食減少，

4、體重減輕，精神萎靡，活動(dòng)減少，相互擁擠、蜷縮成團(tuán)，對(duì)外界刺激反應(yīng)減弱。在術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)比較，給藥組大鼠在飲食、活動(dòng)量、動(dòng)物反應(yīng)速度方面優(yōu)于模型組。
　　 (2)血生化結(jié)果顯示:假手術(shù)組大鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中BUN、Scr、ALB均維持在正常范圍之內(nèi);與假手術(shù)組相比，模型組與給藥組大鼠BUN、Scr均有不同程度增高（P＜0.01）;ALB有不同程度的下降(P＜0.05)。與模型組相比，氯沙坦組與通絡(luò)活血方組BUN、Scr降低，ALB增

5、高，且以通絡(luò)活血方組明顯。
　　 (3)病理結(jié)果顯示:假手術(shù)組大鼠各時(shí)間點(diǎn)腎組織染色均勻，腎小管上皮細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整、清晰，小管與小管之間間隙緊密，沒有炎性細(xì)胞浸潤，小管基底膜光滑、連續(xù);與假手術(shù)組相比，模型組大鼠UUO術(shù)后7天即見腎小管管腔擴(kuò)張，部分腎小管上皮細(xì)胞腫脹，間質(zhì)增寬，到第14天擴(kuò)張明顯，腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤，膠原蛋白增加，部分腎小管輕度萎縮，消失，到第21天可見腎小管廣泛擴(kuò)張，彌漫性腎小管上皮細(xì)胞空泡變性，

6、部分腎小管管腔內(nèi)有蛋白或細(xì)胞管型，灶狀腎小管擴(kuò)張，灶狀萎縮，間質(zhì)細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)成分增多，纖維化程度嚴(yán)重;與模型組相比，相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)給藥組的炎性細(xì)胞浸潤較模型組減輕，纖維化面積較模型組減少;對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)內(nèi)，通絡(luò)活血方組的受損程度和纖維化程度輕于氯沙坦組，三個(gè)時(shí)間點(diǎn)比較，雖然給藥組的纖維化程度不斷加重，但是加重的程度明顯減輕。
　　 (4)免疫組化結(jié)果顯示:假手術(shù)組大鼠各時(shí)間點(diǎn)內(nèi)，腎組織HIF-1α、PDGF、VCAM-1蛋白表達(dá)均在

7、正常范圍內(nèi);與假手術(shù)組相比，模型組大鼠隨時(shí)間延長，腎組織HIF-1α、PDGF、VCAM-1蛋白表達(dá)逐漸增加，腎小管間質(zhì)損傷的程度逐漸加重，與模型組相比，給藥組大鼠腎組織HIF-1α、PDGF、VCAM-1蛋白的表達(dá)有所降低（P＜0.01或P＜0.05），以通絡(luò)活血方組降低明顯，腎組織HIF-1α、PDGF、VCAM-1蛋白的表達(dá)及腎小管間質(zhì)損傷指數(shù)之間呈正相關(guān)。
　　 結(jié)論:
　　 (1)本實(shí)驗(yàn)中，UUO大鼠術(shù)側(cè)腎組織