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文檔簡介
1、目的:本研究的目的是通過形態(tài)學觀察、MTT法、檢測細胞上清液中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性來闡明銀杏達莫注射液對缺氧-再復氧的人臍靜脈內(nèi)皮細胞的保護作用,探討該藥在冠狀動脈缺血再灌注損傷治療中的內(nèi)在機制,進而能更好地為冠脈支架植入術后即阻塞血管再通后的血管內(nèi)皮細胞的保護作用提供綜合性的理論基礎,更好地指導臨床用藥,為設計新的抗缺血再灌注治療方案及開發(fā)有效的臨床治療藥物提供科學依據(jù)。
方
2、法:本實驗采用人臍靜脈內(nèi)皮細胞株(Human Vascular Endothelial Cells,HUVECs)體外傳代培養(yǎng)方法。將血管內(nèi)皮細胞分為3組,即①正常組:正常血管內(nèi)皮細胞;②缺氧-再復氧組:用1mmol/L連二亞硫酸鈉處理后再給予完全DMEM培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24h;③銀杏達莫注射液組:缺氧后再加不同濃度銀杏達莫注射液的完全DMEM培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24小時。通過倒置相差顯微鏡觀察和比較各組內(nèi)皮細胞在形態(tài)上的變化,用MTT法檢測細
3、胞吸光度值,采用酶聯(lián)免疫吸附的方法(ELISA)分別測定細胞上清液中的NO、MDA含量及SOD活性,并進行相關比較。
結(jié)果:MTT比色法結(jié)果顯示:缺氧-再復氧組的OD值明顯降低,而正常組和銀杏達莫注射液組的OD值則明顯增高。正常組、銀杏達莫注射液組與缺氧-復氧組OD值有顯著差異(P<0.05)。缺氧-復氧組組中的MDA含量增加,而NO含量降低。相反,正常組和銀杏達莫注射液組中MDA含量減少,而NO含量增高。正常組、缺氧-復氧組
4、及銀杏達莫注射液組細胞培養(yǎng)上清液中MDA、NO含量相比較均有明顯差異(P<0.01)。單純?nèi)毖?復氧組中的SOD活性明顯降低,正常組和銀杏達莫注射液組中的SOD活性則有所升高。正常組和銀杏達莫注射液組與單純?nèi)毖?復氧組中的細胞培養(yǎng)上清液中的SOD活性具有明顯差異(P<0.01),但正常組和銀杏達莫注射液組中的細胞培養(yǎng)上清液中的SOD活性無明顯差異(P>0.05)。
結(jié)論:銀杏達莫注射液對缺氧—再復氧損傷的血管內(nèi)皮細胞具有保護作
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