死亡相關(guān)蛋白3（Death associated protein 3,DAP3）在胃癌中的表達(dá)及其意義.pdf

1、後旦大擎博士學(xué)位論文學(xué)校代碼；1 0 2 4 6學(xué) 號(hào)；0 1 1 1 0 5 8 1 1死d 彤鼬3 ( D e a t h a s s o c i a t e dp r o t e i n3 ，D A P 3 )翻翰簿舶潞越- 圾撤院 系：專 業(yè)：姓 名：指導(dǎo)教師：完成日期：華山醫(yī)院外科學(xué)陳進(jìn)宏蔡 端教授2 0 0 4 年1 0 月勰日死產(chǎn)相關(guān)蛋白3 在胃癌中的表達(dá)及其意義死亡相關(guān)蛋白3 ( D e a t hA s s o c i

2、 a t e d P r o t e i n3 ，D A P 3 )在胃癌中的表達(dá)及其意義中文摘要近來胃癌的發(fā)病率仍居高不下，在我國(guó)居惡性腫瘤發(fā)病率和死亡率前列。研究胃癌的凋亡機(jī)制有助于了解胃癌的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)歸等生物學(xué)特性，開拓胃癌治療的新手段。死亡相關(guān)蛋白( D e a t hA s s o c i a t e dP r o t e i n ，D A P ) 是一組凋亡蛋白家族，其中死亡相關(guān)蛋白激酶和組織蛋白酶D 己被廣泛研究，而

3、死亡相關(guān)蛋白3 ( D A P 3 ) 由于與腫瘤壞死因子超家族成員誘發(fā)的凋亡密切相關(guān)，最近研究較多。本文旨在通過體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)觀察死亡相關(guān)蛋白3 ( D A P 3 ) 在胃癌中的表達(dá)并探討T R A I L 、r h —T N F Ⅱ和5 一F U 等藥物對(duì)其的影響；觀察D A P 3 與c a s p a s e8 的關(guān)系，探討D A P 3 參與藥物引起胃癌凋亡的可能機(jī)制：并觀察人胃癌組織中D A P 3 表達(dá)與T R A

4、I L 的受體D 融、D R 。表達(dá)的關(guān)系，以臨床驗(yàn)證D A P 3 與T R A I L 治療胃癌的關(guān)系以及探討D A P 3 檢測(cè)的臨床意義。一、死亡蛋白3 ( D A P 3 ) 在人胃癌細(xì)胞株B G C - 8 2 3 和H G C - 2 7 中的表達(dá)以及T R A I L 、r h —T N F d 和5 一F U 對(duì)其影響[ 目的] 觀察死亡蛋白3 ( D A P 3 ) 在人胃癌細(xì)胞株B G C 一8 2 3 和H G

5、C 一2 7 中的表達(dá)以及T R A I L 、r h —T N F a 和5 一F u 對(duì)其影響，探討D A P 3 對(duì)于胃癌發(fā)病學(xué)的意義以及在藥物治療胃癌中的指導(dǎo)作用。[ 方法] 體外培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞株B G C 一8 2 3 和H G C - 2 7 ，先以不同濃度的T R A I L ( 0 、5 0 n g ／m l 、l O O n g ／m l 、2 0 0 n g ／m 1 ) ．r h —T N F Ⅱ( 0 ，5 0

6、n g ／m l 、l O O n g ／m l 、2 0 0 n g ／m 1 )和5 - F U ( 0 、1 0 1 M 、1 0 “M 、1 0 “M ) 作用4 8 小時(shí)后，酸性磷酸酶法測(cè)定O D 值，確定T R A I L 、r h - T N F a 和5 - F U 的治療濃度；再以治療濃度的T R A I L 、r h —T N F a 和5 一F U作用于人胃瘸細(xì)胞株B G C 一8 2 3 和H G C 一2 7

7、，W e s t e r nb l o t 法測(cè)定治療前后D A P 3的表達(dá)變化情況。[ 結(jié)果] 1 ，0 、5 0 n g ／m l 、l O O n g ／m l 、2 0 0 n g ／m l 的T R A I L 作用于B G C - 8 2 34 8 小時(shí)后O D 值分別為0 ．5 6 5 ±0 ．0 3 9 、0 ．5 5 5 ±0 ．0 4 9 、0 ．3 3 9 ±0 ．0 4 4 和0