漢防己甲素對(duì)屈光術(shù)后haze的抑制作用及其機(jī)制的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究漢防己甲素(tetrandrine，Tet)對(duì)屈光術(shù)后haze的抑制作用并對(duì)其作用機(jī)制和較好的用藥方式進(jìn)行探討，以期發(fā)現(xiàn)一種抑制haze效果好而毒副作用又小的新藥，從而為屈光術(shù)后的臨床用藥提供新的選擇。 方法：選用72只健康新西蘭大白兔，建立PRK手術(shù)模型。第一部分：研究Tet術(shù)前和術(shù)后早期干預(yù)能否在創(chuàng)傷愈合早期對(duì)haze形成的啟動(dòng)因素產(chǎn)生抑制作用。將其中24只隨機(jī)分為空白對(duì)照組、FML對(duì)照組(術(shù)前3d和術(shù)后4h聯(lián)合上

2、皮愈后點(diǎn)O．1％FML)、實(shí)驗(yàn)A組術(shù)(術(shù)后4h聯(lián)合愈后點(diǎn)O．1％Tet)、實(shí)驗(yàn)B組(術(shù)前3d和術(shù)后4h聯(lián)合愈后點(diǎn)O．1％Tet)四組。于術(shù)后4h和1m時(shí)光鏡下行角膜形態(tài)學(xué)觀察；TUNEL法檢測角膜基質(zhì)細(xì)胞凋亡情況；免疫組化檢測損傷調(diào)控分子NF-кB的表達(dá)并光鏡下行陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)分析。第二部分：研究Tet對(duì)PRK術(shù)后haze的抑制作用并探討其在創(chuàng)傷愈合過程中的作用機(jī)制和較好的用藥方式。將其余48只隨機(jī)分為空白對(duì)照組、FML對(duì)照組(角膜上皮愈

3、后點(diǎn)O．1％FML)、實(shí)驗(yàn)I組(愈后點(diǎn)O．1％Tet)、實(shí)驗(yàn)Ⅱ組(術(shù)前3d和術(shù)后4h聯(lián)合愈后點(diǎn)O．1％Tet)四組。分別于術(shù)后1m、2m、4m時(shí)用裂隙燈顯微鏡觀察并記錄各組haze分級(jí)；光鏡和透射電鏡進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察；原位雜交法檢測角膜基質(zhì)FN和III型膠原mRNA的表達(dá)，免疫組化檢測角膜創(chuàng)傷愈合調(diào)控分子TGF-p1和NF-r,B的表達(dá)，并應(yīng)用ImageProPlus5．O圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行定量分析。 結(jié)果：①4h凋亡細(xì)胞數(shù)：實(shí)驗(yàn)組

4、較FML組和空白組增多(P<0．05)，1m時(shí)各組基本無凋亡可檢出，組間比較無差異；②實(shí)驗(yàn)組4hNF-кB胞核表達(dá)較FML組和空白組少(P<0．05)。③裂隙燈顯微鏡觀察，實(shí)驗(yàn)組和FML組haze明顯較空白組減輕，且試驗(yàn)組和FML組haze分級(jí)無差異；④實(shí)驗(yàn)組和FML組角膜基質(zhì)FN和Ⅲ型膠原表達(dá)均低于空白組，差異有顯著性意義；⑤實(shí)驗(yàn)組和FML組TGF-β1表達(dá)較空白組低、NF-r,B的胞漿表達(dá)較空白組高，差異有顯著性意義；⑥實(shí)驗(yàn)Ⅰ組ha

5、ze分級(jí)、ECM以及調(diào)控因子的表達(dá)與實(shí)驗(yàn)II組比較差異無顯著性意義。 結(jié)論：①Tet在PRK術(shù)前和術(shù)后早期干預(yù)具有促進(jìn)角膜基質(zhì)細(xì)胞凋亡的作用；②Tet早期干預(yù)可抑制NF-кB的激活，且作用明顯強(qiáng)于FML。③Tet對(duì)屈光術(shù)后haze形成有明顯的抑制作用，與FML相當(dāng)；④Tet可減少細(xì)胞外基質(zhì)一FN、Ⅲ型膠原的生成；⑤Tet在愈合過程中也可降低角膜基質(zhì)TGF-β1的表達(dá)和NF-кB的活性且作用強(qiáng)于FML；⑥實(shí)驗(yàn)Ⅰ組與Ⅱ組各指標(biāo)比較無