板藍根多糖的化學(xué)分離及其免疫增強活性的研究.pdf

1、板藍根為十字花科菘藍屬植物菘藍Isatis indigotica Fort的干燥根，性寒味苦，有清熱解毒、涼血消腫的功效。板藍根中含有豐富的有機酸類、生物堿類及多糖成分，這些成分各自發(fā)揮不同的藥理活性，共同使板藍根發(fā)揮抗內(nèi)毒素、抗病毒、抗炎以及免疫調(diào)節(jié)的藥理作用。 目的:建立板藍根多糖（IIF）化學(xué)分離的工藝流程?？疾彀逅{根多糖對小鼠淋巴細胞分泌IL-10、INF-γ以及NK細胞活性的影響。 方法: 提取工藝：以

2、浸膏得率為指標(biāo)，考察提取溫度、煎煮時間和加水量對多糖提取效果的影響，確定多糖提取的最佳工藝條件。以脫色率為指標(biāo)，設(shè)計3因素3水平的正交設(shè)計表，考察樹脂類型、上樣量、流速對多糖脫色效果的影響，選擇適宜對板藍根多糖進行脫色的樹脂。脫色后的多糖溶液裝入透析袋內(nèi)透析，除去多糖溶液中的小分子物質(zhì)。以多糖的損失率為指標(biāo)，考察不同透析時間對多糖透析效果的影響。利用凝膠層析技術(shù)，分別采用兩種不同型號和功能的凝膠純化得到板藍根多糖－IIF，并利用薄層層析

3、技術(shù)和HPLC-ELSD系統(tǒng)檢測IIF的純度和分子量。（整個提取、純化過程均采用硫酸-苯酚法跟蹤檢測多糖的含量） 活性研究：采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（Elisa）考察板藍根多糖對小鼠淋巴細胞分泌IL-10和IFN-γ數(shù)量的影響，同時利用乳酸脫氫酶釋放法測定IIF對小鼠NK細胞活性的影響。 結(jié)果:經(jīng)過初提、脫色、超濾、純化4步工序得到的板藍根多糖純度為93％；分子量為65×104；其體外活性試驗研究表明，板藍根多糖能明顯提高小