脫細胞神經(jīng)基質(zhì)移植物對脊髓前角和脊神經(jīng)節(jié)細胞的保護作用.pdf

1、目的 近年來，研究者應(yīng)用組織工程學(xué)原理和方法，對周圍神經(jīng)進行脫細胞處理，制備了神經(jīng)細胞外基質(zhì)移植物；并用此種移植物修復(fù)周圍神經(jīng)缺損，獲得了促進受損神經(jīng)纖維再生及其功能恢復(fù)良好的效果。然而該種移植物對發(fā)出相關(guān)神經(jīng)纖維的神經(jīng)母細胞(如脊神經(jīng)的脊髓前角細胞和神經(jīng)節(jié)細胞)有何作用，尚未見有文獻報導(dǎo)。該研究對此問題進行了探討。 方法 用wistar大鼠30只，10只用化學(xué)提取法制備坐骨神經(jīng)脫細胞基質(zhì)移植物；另20只分為實驗

2、組(坐骨神經(jīng)缺損脫細胞基質(zhì)移植物橋接組)和對照組(坐骨神經(jīng)缺損組)，每組10只。動物飼養(yǎng)3到4個月后取移植物，脊髓腰7-骶2節(jié)段和同節(jié)段脊神經(jīng)節(jié)，做HE，尼氏染色標(biāo)本以及電鏡標(biāo)本，進行組織學(xué)和超微結(jié)構(gòu)觀察，并對脊髓前角和脊神經(jīng)節(jié)細胞的數(shù)量進行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果 用化學(xué)提取法制備脫細胞周圍神經(jīng)基質(zhì)移植物的各步驟如果改在室溫下進行，可縮短制備時間7-10天。實驗組(脫細胞移植物橋接神經(jīng)缺損)術(shù)后跟蹤觀察大鼠的自然狀態(tài)可見，術(shù)

3、后3或4個月時，移植術(shù)側(cè)下肢行走時后蹬動作有力，足趾能分開，步態(tài)趨于正常；針刺足底有逃避動作。對照組(神經(jīng)缺損)動物術(shù)側(cè)下肢的運動和感覺功能未見恢復(fù)。術(shù)后3或4個月實驗組動物移植物的HE染色橫切片和縱切片標(biāo)本上，見有大量的再生·1·神經(jīng)纖維；在電鏡標(biāo)本上，再生軸突，髓鞘及施萬細胞也清晰可見。實驗組和對照組正常側(cè)的脊髓L7-S2節(jié)段前角細胞的HE和尼氏染色標(biāo)本可見，細胞形體較大，分為內(nèi)側(cè)群和外側(cè)群，胞質(zhì)內(nèi)有較豐富的呈斑塊狀的尼氏體。實驗組

4、移植物和對照組缺損側(cè)脊髓L7-S2節(jié)段前角細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)基本正常，但是分群已不明顯，并有膠質(zhì)細胞增生。特別是支配四肢肌的前角細胞的數(shù)量減少，尤以對照組為甚。統(tǒng)計分析結(jié)果表明，脊髓前角細胞數(shù)實驗組移植側(cè)(10.37±1.45)與正常側(cè)(14.40±1.81)以及移植側(cè)與對照組缺損側(cè)(5.97±1.69)比較，差異均顯著(P＜0.01)。 實驗組和對照組正常側(cè)L7-S2脊神經(jīng)節(jié)HE和尼氏染色標(biāo)本可見，細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，胞質(zhì)內(nèi)充滿細砂

5、粒狀尼氏體，由大、中、小細胞組成。實驗組移植側(cè)和對照組缺損側(cè)的L7-S2脊神經(jīng)節(jié)細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)基本正常。 但是其數(shù)量較正常側(cè)減少，并以對照組缺損側(cè)最為明顯。統(tǒng)計分析結(jié)果表明，脊神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)實驗組移植側(cè)(45.57±5.88)與正常側(cè)(53.57±6.57)以及移植側(cè)與對照組缺損側(cè)(36.90±5.15)比較，差異均有顯著性意義(P＜0.01)。 結(jié)論 該實驗在無菌，室溫條件下制備周圍神經(jīng)細胞外基質(zhì)移植物能夠縮短時