NO、OPG-RANKL在大鼠運(yùn)動(dòng)性骨損傷發(fā)生過程中的表達(dá)及作用研究.pdf

1、研究目的：
　　過度訓(xùn)練或過度使用導(dǎo)致骨骼損傷易感性增加，進(jìn)一步加劇的應(yīng)力刺激能夠產(chǎn)生運(yùn)動(dòng)性骨損傷。運(yùn)動(dòng)性骨損傷是應(yīng)力性骨折的一種，是困擾運(yùn)動(dòng)員和教練員的一個(gè)棘手問題，然而有關(guān)運(yùn)動(dòng)性骨損傷發(fā)生的具體機(jī)制仍不清楚。本實(shí)驗(yàn)采用大負(fù)荷跳躍運(yùn)動(dòng)方式建立運(yùn)動(dòng)性骨損傷大鼠模型，從傳統(tǒng)骨代謝生化指標(biāo)、一氧化氮和OPG、RANKL基因表達(dá)等方面入手，探討運(yùn)動(dòng)性骨損傷發(fā)生的分子機(jī)制。
　　研究方法：
　　48只2月齡雄性SD大鼠，隨機(jī)平

2、均分為對(duì)照組和跳躍組，每組24只。跳躍組大鼠置于自制跳躍電刺激籠內(nèi)進(jìn)行大負(fù)荷跳躍訓(xùn)練，對(duì)照組安靜飼養(yǎng)，每?jī)芍芊謩e從兩組中取8只大鼠處死取材，6周時(shí)結(jié)束實(shí)驗(yàn)。每次取材實(shí)驗(yàn)時(shí)心臟取血，采用比色法檢測(cè)骨代謝生化標(biāo)志物血清堿性磷酸酶（AKP）和抗酒石酸酸性磷酸酶（StrACP），采用化學(xué)法檢測(cè)NO和NOS酶活性。大鼠一側(cè)脛骨制作HE石蠟切片并染色觀察，另一測(cè)取骨干端部分骨質(zhì)使用磨骨鉗碾磨后，提取 RNA，應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)目的基因OPG、R

3、ANKLmRNA的表達(dá)。
　　研究結(jié)果：
　?。?）跳躍組AKP活性第2周和第4周時(shí)活性均高于對(duì)照組（p<0.05），而跳躍6周后活性極顯著高于對(duì)照組（p<0.01）。與對(duì)照組相比，跳躍2、6周組大鼠StrACP極顯著升高（p<0.01），跳躍4周組顯著升高（p<0.05），其中跳躍2、4周組升高幅度基本一致，而跳躍6周組升高幅度最大。
　?。?）跳躍2周組NO水平有升高趨勢(shì)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05），跳躍4周組

4、NO水平顯著升高（p<0.05），而跳躍6周組NO升高幅度最大，具有非常顯著性差異（p<0.01），血清iNOS在6周時(shí)活性下降，未發(fā)現(xiàn)與NO存在相關(guān)性。
　?。?）經(jīng)過2周跳躍刺激，與對(duì)照2周組相比大鼠脛骨OPGmRNA表達(dá)量輕微下降（p<0.05），而跳躍4周時(shí)，OPGmRNA表達(dá)回升與對(duì)照組無差異，而到6周時(shí)，OPGmRNA表達(dá)明顯升高（p<0.01）。跳躍2周、4周組大鼠脛骨RANKLmRNA表達(dá)有所增加，但無顯著性差異，

5、跳躍6周組 RANKL mRNA表達(dá)量顯著增加（p<0.01）。
　?。?）跳躍組血清NO水平與OPG mRNA表達(dá)、RANKL mRNA的表達(dá)和血清AKP活性存在相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)分別是r=0.819（p<0.01）、0.864（p<0.01）和0.536（p<0.05）；OPG與 RANKLmRNA表達(dá)量之間存在高度相關(guān)性（r=0.947， p<0.01），OPG與AKP之間也存在相關(guān)性（r=0.615，p<0.01）；RANK