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文檔簡介
1、毛囊隆突區(qū)(bulge region)是毛囊干細(xì)胞的主要棲息地,最近實(shí)驗(yàn)證實(shí)隆突區(qū)干細(xì)胞不僅能遷移產(chǎn)生皮脂腺和表皮,而且能遷移產(chǎn)生新的毛囊。 皮脂腺細(xì)胞的生長和分化受視黃醛衍生物(retinoid)、激素(hormones)和細(xì)胞因子(cytokines)的調(diào)控。雄激素對皮脂腺細(xì)胞的發(fā)育成熟以及皮脂的合成分泌具促進(jìn)作用。雄激素受體是一種配體依賴性的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白,參與雄激素激發(fā)的各種生理功能的調(diào)節(jié)。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,在人的皮脂腺(seb
2、aceous gland,SG)的基底層和毛囊外根鞘(outer rootsheath,ORS)中均有雄激素受體的表達(dá)。 為了探索雄激素對毛囊干細(xì)胞定向分化為皮脂腺細(xì)胞的過程是否具有促進(jìn)功能,我們進(jìn)行了如下的實(shí)驗(yàn)來進(jìn)行研究: 第一步,檢測了在毛囊周期的三個(gè)不同時(shí)期(生長期、退化期和靜止期)中大鼠觸須毛囊干細(xì)胞中AR、ARmRNA的表達(dá)以及檢測原代培養(yǎng)的毛囊干細(xì)胞中AR的表達(dá)并探討意義,為進(jìn)一步研究打下基礎(chǔ)。 第二
3、步,在體外培養(yǎng)毛囊干細(xì)胞并檢測了AR、K15、CD34以及β1-integrin的表達(dá)。 第三步,將培養(yǎng)細(xì)胞分成誘導(dǎo)組和對照組: ①誘導(dǎo)組細(xì)胞:改用添加了雄激素的誘導(dǎo)培養(yǎng)基來培養(yǎng),以此誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的毛囊干細(xì)胞向皮脂腺細(xì)胞的定向分化,檢測上皮膜抗原(epithelial membrane antigen,EMA)和脂滴在誘導(dǎo)細(xì)胞中的表達(dá); ②對照組細(xì)胞:作對照,仍繼續(xù)用未添加雄激素的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),檢測上皮膜抗原(
4、epithelial membrane antigen,EMlA)和脂滴在對照細(xì)胞中的表達(dá)。 方法: 采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測AR、K15、CD34、β1-integrin以及EMA的表達(dá)。采用油紅O組織化學(xué)染色技術(shù)檢測脂滴的形成情況。采用RT-PCR檢測AR mRNA的表達(dá)。在體外用添加了雄激素的培養(yǎng)基來誘導(dǎo)毛囊干細(xì)胞向皮脂腺細(xì)胞定向分化。 結(jié)果: 1.在體情況下,生長期、退化期和靜止期大鼠觸須毛囊干細(xì)
5、胞中均有AR表達(dá)。 2.AR在生長期呈強(qiáng)表達(dá),而在退化期和靜止期表達(dá)微弱;AR mRNA在生長期呈強(qiáng)表達(dá),而在退化期和靜止期表達(dá)微弱;AR表達(dá)變化趨勢與AR mRNA表達(dá)變化趨勢一致。AR表達(dá)變化趨勢與毛囊干細(xì)胞的增殖分化能力呈一致性。 3.體外情況下,培養(yǎng)的毛囊干細(xì)胞中有AR、K15、CD34和β1-integrin的表達(dá)。 4.用免疫細(xì)胞化學(xué)檢測到誘導(dǎo)后的細(xì)胞中EMA的表達(dá)呈陽性,而未經(jīng)誘導(dǎo)處理的細(xì)胞表達(dá)呈陰
6、性;用油紅O染色檢測到誘導(dǎo)后的細(xì)胞中有脂滴的形成,而在未經(jīng)誘導(dǎo)的細(xì)胞中沒有脂滴的形成。 結(jié)論: 1.大鼠觸須毛囊隆突區(qū)在整個(gè)毛囊周期中均有AR表達(dá),是雄激素作用的靶組織。體外培養(yǎng)的毛囊干細(xì)胞亦是AR靶細(xì)胞并能較好地保持了其干細(xì)胞性。 2.AR和AR mRNA在毛囊周期中呈規(guī)律性表達(dá),AR表達(dá)變化趨勢與AR mRNA表達(dá)變化趨勢一致。AR表達(dá)變化趨勢與毛囊干細(xì)胞的增殖分化能力呈一致性。 3.用免疫細(xì)胞化學(xué)檢
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