人胃癌MKN-28細(xì)胞母亞兩系侵襲與多藥耐藥關(guān)系的初步研究.pdf

1、目的：探討人胃癌MKN-28細(xì)胞母亞兩系侵襲與多藥耐藥之間的關(guān)系及其相關(guān)機(jī)制。
　　方法：Transwell體外侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)篩選出的人胃癌細(xì)胞亞系(MKN-28S10)與母系(MKN-28)兩系侵襲潛能;Western blot法檢測(cè)兩系細(xì)胞MMP-9、MMP-2、P-gp、MRP1、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表達(dá)變化以及用不同濃度的MAPK/ERK特異性阻斷劑U0126處理高侵襲亞系細(xì)胞后MMP-9、MMP-2、P-gp

2、、MRP1蛋白表達(dá)變化;SP免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)兩系細(xì)胞MMP-9、MMP-2、P-gp、MRP1蛋白表達(dá)變化;采用MTT法比較兩系對(duì)阿霉素(ADM)、絲裂霉素(MMC)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)三種化療藥物的敏感性。
　　結(jié)果：Transwell體外侵襲實(shí)驗(yàn)示人胃癌細(xì)胞株亞系細(xì)胞(MKN-28S10)侵襲至基質(zhì)膠膜背面的數(shù)量較母系(MKN-28)明顯增多(P<0.05),細(xì)胞侵襲能力明顯增強(qiáng);Western blot及免疫細(xì)胞化學(xué)

3、結(jié)果示篩選出的亞系細(xì)胞MMP-9、MMP-2、P-gp、MRP1蛋白表達(dá)同母系相比顯著增強(qiáng);Western blot結(jié)果顯示亞系細(xì)胞p-ERK1/2蛋白表達(dá)同母系相比顯著增強(qiáng)(P<0.01),但ERK1/2蛋白表達(dá)同母系相比差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05); MTT結(jié)果示亞系對(duì)ADM、MMC、5-Fu的敏感性較母系顯著減弱(P<0.05);用不同濃度的MAPK/ERK特異性阻斷劑U0126處理高侵襲亞系細(xì)胞后MMP-9、MMP-2、P-

4、gp、MRP1蛋白表達(dá)隨阻斷劑濃度的增加而相應(yīng)減弱(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.篩選出的人胃癌細(xì)胞亞系(MKN-28S10)的侵襲潛能較母系(MKN-28)增強(qiáng);
　　2.篩選出的人胃癌細(xì)胞亞系(MKN-28S10)的多藥耐藥性較母系(MKN-28)增強(qiáng);
　　3.人胃癌細(xì)胞侵襲潛能的改變可以影響腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性;
　　4.ERK1/2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)調(diào)節(jié)MMP-9、MMP-2、P-gp、MRP1