槐耳浸膏對(duì)人胃癌細(xì)胞系MKN-45凋亡及侵襲轉(zhuǎn)移的影響.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)槐耳浸膏體外誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞系MKN-45、SGC-7901凋亡及抑制MMP-2和MMP-9表達(dá)的研究，為槐耳浸膏在臨床上治療胃癌提供理論依據(jù)。
　　 方法:濃度為0mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml的槐耳浸膏分別作用于胃癌細(xì)胞系MKN-45和SGC-790124h，經(jīng)AO/EB熒光染色后，顯微鏡下觀察其形態(tài)學(xué)表現(xiàn);濃度為0mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml的槐耳浸膏分

2、別作用于胃癌細(xì)胞系MKN-45和SGC-790124h、48h、72h后，運(yùn)用流式細(xì)胞技術(shù)分析其凋亡率;濃度為0mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml的槐耳浸膏作用于胃癌細(xì)胞系MKN-45及SGC-790124h后，采用RT-PCR法檢測(cè)MMP-2、MMP-9的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:熒光顯微鏡下，正常細(xì)胞呈綠染，大小均一，結(jié)構(gòu)完整;凋亡細(xì)胞呈黃染，形態(tài)不規(guī)則，細(xì)胞膜可見芽狀突起，細(xì)胞核固縮、碎裂，染色質(zhì)濃染沿

3、核膜分布;壞死細(xì)胞染成紅色，大小形態(tài)較均一。隨著藥物濃度的增加，凋亡細(xì)胞與壞死細(xì)胞比例逐漸增加。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果示槐耳浸膏作用于MKN-45細(xì)胞24h后，對(duì)照組、5mg/ml組、10mg/ml組及20mg/ml組的凋亡率(％)分別為6.52±0.87、14.58±1.03、18.00±1.13、23.13±1.24;作用于MKN-45細(xì)胞48h后，凋亡率(％)依次為7.27±1.16、18.31±1.65、24.47±1.33、27.

4、16±1.66;作用于MKN-45細(xì)胞72h后，凋亡率(％)依次為7.45±0.96、50.23±1.55、58.00±1.87、68.98±1.43。槐耳浸膏作用于SGC-7901細(xì)胞24h后，對(duì)照組、5mg/ml組、10mg/ml組、20mg/ml組的凋亡率(％)分別為12.89±1.01、19.40±1.15、21.96±1.67、23.05±1.89;作用48h后凋亡率(％)分別為10.05±1.33、40.89±1.40、51

5、.57±1.96、66.22±1.88;作用72h后凋亡率(％)分別為27.37±1.78、49.69±1.35、65.07±1.43、69.01±1.97。濃度相同，兩種細(xì)胞的凋亡率均隨著時(shí)間的增加而增加;同一時(shí)間，兩種細(xì)胞的凋亡率均隨著濃度的增加而增加(P＜0.05)。相同作用條件，SGC-7901細(xì)胞的凋亡率較MKN-45細(xì)胞有增高趨勢(shì)。RT-PCR結(jié)果顯示槐耳浸膏作用于胃癌MKN-45細(xì)胞后，對(duì)照組、5mg/ml組、10mg/m

6、l組及20mg/ml組的MMP-2的表達(dá)量依次為0.64±0.02、0.49±0.01、0.36±0.02、0.32±0.01;MMP-9的表達(dá)量依次為0.71±0.01、0.54±0.02、0.47±0.02、0.39±0.02（P＜0.05）?；倍嘧饔糜谖赴㏒GC-7901細(xì)胞后，對(duì)照組、5mg/ml組、10mg/ml組及20mg/ml組的MMP-2的表達(dá)量依次為0.64±0.01、0.42±0.02、0.34±0.20、0.2

7、9±0.01;MMP-9的表達(dá)量依次為0.65±0.15、0.47±0.01、0.44±0.01、0.39±0.02(P＜0.05)。與對(duì)照組相比，兩種細(xì)胞各濃度組MMP-2和MMP-9表達(dá)水平均減少(P＜0.05)。隨著濃度的增加，MMP-2和MMP-9的表達(dá)水平逐漸降低。
　　 結(jié)論:槐耳浸膏在體外可誘導(dǎo)胃癌MKN-45和SGC-7901細(xì)胞的凋亡，并表現(xiàn)為劑量依賴性和時(shí)間依賴性;槐耳浸膏在體外可明顯抑制胃癌MKN-45和S