紫楠有效成分分離純化鑒定及其生物活性研究.pdf

1、紫楠是樟科楠屬植物，紫楠是極其珍貴的用材樹種，供建筑、貴重家具和細(xì)工用，是我國南方普遍可見的重要經(jīng)濟(jì)作用林，在森林、園林、木材、香料等方面都占有重要的地位。紫楠在國內(nèi)主要散布在長江流域及華南地區(qū)，在我國民間也可以作為草藥應(yīng)用，具備比較好的活性功能，如治療腹瀉、鎮(zhèn)痛、抗炎抑菌等。
　　第一部分論述了常見天然產(chǎn)物活性成分提取、分離、純化方法及具有突破性的研究結(jié)果，同時(shí)對楠木類植物成分分析及生物活性研究進(jìn)行了系統(tǒng)而細(xì)致的總結(jié)。楠木植物中

2、重點(diǎn)含有木酯素類、丁內(nèi)酯類、皂苷類等化學(xué)成分，其重要的生理功能有肝臟保護(hù)功能、神經(jīng)保護(hù)作用、抑制腫瘤細(xì)胞增值活性、Caspase-3酶增強(qiáng)作用等。最后，就整個(gè)紫楠有效成分分析及活性研究的思路和內(nèi)容進(jìn)行了概括，研究內(nèi)容分為紫楠有效成分的高效提取、紫楠各個(gè)極性部位的生物活性篩選、紫楠成分初步分析、紫楠有效成分分離純化及鑒定。
　　第二部分在溶劑浸提的前提下，使用用單因素控制方法，使用響應(yīng)面分析方法優(yōu)化紫楠乙醇浸提物的浸提條件并明確其最

3、適宜的提取方案。分別控制浸提乙醇濃度、浸提時(shí)間、浸提溫度，采用單因素控制實(shí)驗(yàn)以及響應(yīng)面方法分析，三者對提取的影響作用都是極顯著的，同時(shí)提取時(shí)間則影響最大，乙醇濃度次之。綜合分析顯示紫楠醇提物最佳提取條件是：乙醇濃度95％、時(shí)間6h、溫度90℃、料液比1:8，紫楠醇提物在最適條件下提取率為6.6%。
　　第三部分實(shí)驗(yàn)對紫楠的乙醇浸提物及其紫楠石油醚、紫楠乙酸乙酯、紫楠正丁醇三個(gè)極性部分的生物活性進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，其中分別對包含紫楠乙醇

4、浸提物在內(nèi)的四個(gè)極性部位進(jìn)行了抗氧化、微生物生長抑制、抑制腫瘤細(xì)胞增殖等一系列活性實(shí)驗(yàn)。研究結(jié)果顯示，紫楠乙醇浸提物和紫楠乙酸乙酯萃取相體外抗氧化作用較強(qiáng)；而紫楠石油醚萃取相對微生物生長的抑制，尤其是抑制食源性微生物大腸桿菌效果明顯。在抑制腫瘤細(xì)胞增值方面，以SPCA-1、MCF-7、HepG2為研究對象，較之于陽性對照5-氟尿嘧啶發(fā)現(xiàn)，紫楠各極性提取物對腫瘤細(xì)胞生長抑制效果并不明顯，但紫楠四個(gè)成分相比較而言，紫楠乙酸乙酯萃取相對受試的

5、三類腫瘤細(xì)胞都存在廣譜的增值抑制能力。而紫楠石油醚相幾乎沒有細(xì)胞毒活性，紫楠正丁醇萃取相則對人乳腺癌MCF-7細(xì)胞表現(xiàn)出選擇性細(xì)胞毒活性。經(jīng)過對紫楠各極性部分的初步活性篩選，紫楠活性成分可能多集中在自紫楠乙酸乙酯萃取部位，因此在文章第五部分，實(shí)驗(yàn)選擇對紫楠乙酸乙酯萃取相展開分離純化并對制備獲得的化學(xué)成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定分析。
　　第四部分通過液相-串聯(lián)質(zhì)譜、氣相-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)分別對紫楠根莖乙醇提取物和紫楠葉揮發(fā)成分進(jìn)行初步的分析研究。

6、實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，紫楠木材醇提物初步分析，參考相關(guān)數(shù)據(jù)庫分離得到了12個(gè)化合物，它們分別是Tetramethyl-o-scutellarin、烏頭酸、表-兒茶素、兒茶素、鞭毛巨苔酸、Miconioside A、亞油酸、十八碳三烯酸、柚皮素、潤楠丁內(nèi)酯D、異阿魏酸、Myristyl-acetate。而氣相-串聯(lián)質(zhì)譜鑒定紫楠葉揮發(fā)成分共分析獲得了19個(gè)化合物，主要包括α-蒎烯、石竹烯等烯醇類化學(xué)成分。
　　第五部分采用薄層層析及各種柱色譜