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文檔簡介
1、目的:構建糖尿病大鼠皮下基質(zhì)膠血管生成模型,觀察基質(zhì)膠栓中新生血管生成情況,探討Ang-1對基質(zhì)膠栓中新生血管緊密連接蛋白ZO-1的影響。
方法:構建并鑒定高效表達Ang-1腺病毒載體。采用鏈脲菌素(STZ)一次性腹腔注射誘導構建SD大鼠糖尿病模型。將SD大鼠隨機分成正常對照組(6只)、糖尿病組(6只)、空白腺病毒組(6只);及Ang-1腺病毒組(6R)。成模8周后于大鼠腹部皮下植入基質(zhì)膠(Matrigel),并于尾靜脈注
2、射Ang-1腺病毒載體。10周后(即干預處理2周)處死大鼠,取出Matrigel plug,行普通光鏡及電鏡觀察新生血管結構,免疫組化及免疫熒光觀察血管內(nèi)皮細胞標志物JG12和胞質(zhì)緊密粘連蛋白(ZO-1)表達,RT-PCR觀察ZO-1mRNA表達。
結果:①基質(zhì)膠栓肉眼形態(tài)觀察,正常對照組基質(zhì)膠栓呈白色透明狀,糖尿病模型鼠基質(zhì)膠栓呈不同程度的紅色,可見明顯新生血管形成。②基質(zhì)膠栓HE染色,正常對照組中無或極少量新生血管生成
3、。三個糖尿病模型組基質(zhì)膠栓中均能見大量的新生血管,可見管腔樣結構,部分管腔內(nèi)可見大量紅細胞。③免疫組化、熒光顯示三個糖尿病模型組基質(zhì)膠栓中新生血管內(nèi)皮細胞明顯JG12表達,并成毛細血管網(wǎng)樣排列,但未發(fā)現(xiàn)明顯組間差異(P>0.05)。④免疫組化、熒光顯示三個糖尿病模型組基質(zhì)膠栓中新生血管內(nèi)皮細胞有明顯ZO-1蛋白表達,并成毛細血管網(wǎng)樣排列,Ang-1腺病毒組ZO-1蛋白和mRNA的表達明顯高于糖尿病組和空白腺病毒組(P<0.01),但糖尿
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