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1、目的:探討小鼠骨髓來源DC細(xì)胞的抗成熟特性與Notch信號(hào)通路中Jagged-2表達(dá)量之間的關(guān)系。
方法:利用小鼠長(zhǎng)骨來源骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞共培養(yǎng)和姜黃素刺激建立兩組未成熟DC細(xì)胞的模型,通過流式細(xì)胞技術(shù)鑒定兩組細(xì)胞的未成熟性,選取MHC-II、CD40、CD86、CD80為表面標(biāo)志物,鑒定DC細(xì)胞的成熟度,并利用LPS刺激明確兩組細(xì)胞的抗成熟特性,然后利用流式細(xì)胞技術(shù)和Rt-PCR技術(shù)在細(xì)胞膜蛋白水平和基因水平對(duì)Jagged-
2、2的表達(dá)量進(jìn)行檢測(cè),最后在體內(nèi)建立小鼠腳掌炎癥模型,對(duì)兩組實(shí)驗(yàn)組在體內(nèi)的抗成熟特性進(jìn)行研究。
結(jié)果:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與DC細(xì)胞共培養(yǎng)以及姜黃素刺激可以成功的建立未成熟樣的DC細(xì)胞,這兩組細(xì)胞的表面分子MHC-II、CD40、CD86、CD80類似于未成熟DC細(xì)胞,呈現(xiàn)低表達(dá)的趨勢(shì),并且兩組DC細(xì)胞具有抗成熟的特性,在加入LPS刺激后,不表達(dá)類似成熟DC的表面分子,上述細(xì)胞表面標(biāo)志物未呈現(xiàn)表達(dá)上調(diào)的趨勢(shì),仍然表現(xiàn)出類似于未成熟D
3、C細(xì)胞表面分子和功能的特性。Jagged-2在膜蛋白水平兩組實(shí)驗(yàn)組與imDC組之間無明顯差異,而在基因水平表達(dá)有明顯差異,具有抗成熟特性的兩組實(shí)驗(yàn)組明顯高于普通imDC組。在小鼠腳掌炎癥模型中,兩組實(shí)驗(yàn)組的表現(xiàn)也優(yōu)于普通imDC組,兩組實(shí)驗(yàn)組可以明顯的抑制炎癥反應(yīng),而普通imDC組這種效果比較微弱。
結(jié)論:1、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與姜黃素可誘導(dǎo)未成熟DC細(xì)胞表現(xiàn)出抗成熟特性。2、未成熟DC細(xì)胞的抗成熟特性與Jagged-2的高表達(dá)
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