電針對(duì)帕金森病模型大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子及其受體表達(dá)的影響.pdf

1、目的：目前帕金森?。≒D）治療采用藥物替代治療、外科手術(shù)治療、基因移植治療等，但由于不能有效阻止或減緩疾病的發(fā)展、手術(shù)創(chuàng)傷大、移植細(xì)胞存活周期短等原因限制了臨床運(yùn)用。近年來，針灸作為一種獨(dú)特的整體治療方法，在治療早期PD方面取得了可喜的成績(jī)，已經(jīng)被越來越多地運(yùn)用于PD治療中。本課題研究電針對(duì)帕金森病大鼠旋轉(zhuǎn)行為、黑質(zhì)谷胱甘肽含量(Glutathione，GSH)、黑質(zhì)超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase，SOD)、谷胱

2、甘肽過氧化物酶(Glutathione peroxide，GSH-Px)活性、黑質(zhì)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(Brain-derived neurotrophic factor，BDNF)及其受體酪氨酸激酶B(Tyrosine kinase-B，TrkB)表達(dá)的影響，探討電針對(duì)PD治療作用及其作用機(jī)理，為針灸臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 本課題共用Wistar大鼠90只，隨機(jī)分為正常組16只、假手術(shù)組20只。采用右側(cè)黑質(zhì)注射微量6

3、-羥基多巴胺(6-hydroxy dopamine，6-OHDA)誘導(dǎo)PD大鼠模型，假手術(shù)組注射等體積的生理鹽水。造模4周后，腹腔注射阿撲嗎啡(Apomorphine，APO)(0.5mg/kg)誘發(fā)旋轉(zhuǎn)，記錄其30min內(nèi)的旋轉(zhuǎn)次數(shù)，超過7轉(zhuǎn)/min即為成功PD模型，將造模成功的大鼠隨機(jī)分成兩組，即模型組、電針組。電針組取風(fēng)府穴、太沖穴(雙側(cè))進(jìn)行治療，雙側(cè)太沖穴用28號(hào)0.5寸不銹鋼毫針針刺，風(fēng)府穴用28號(hào)1寸不銹鋼毫針針刺，接G6

4、805-2型電針治療儀(右側(cè)太沖穴與風(fēng)府穴為一對(duì)電極)，連續(xù)波，頻率100Hz，強(qiáng)度1mA，留針15min，每天1次，6天為1療程，療程間隔1天，治療2療程，治療結(jié)束后進(jìn)行各指標(biāo)檢測(cè)。 1．行為學(xué)檢測(cè)治療結(jié)束后開始行為學(xué)檢測(cè)，給受試大鼠腹腔注射APO(0.5mg/Kg)，以誘發(fā)大鼠向健側(cè)(左側(cè))單向旋轉(zhuǎn)。每次在注射APO15min后開始記錄，共記錄30min內(nèi)旋轉(zhuǎn)圈數(shù)，每周2次，連續(xù)2周。 2．SOD、GSH-Px活性及

5、GSH含量于冰臺(tái)上分離右側(cè)黑質(zhì)，稱重后用手工勻漿法制成10％組織勻漿，3000r/min離心45min，取上清液，配制成適當(dāng)?shù)臐舛确謩e測(cè)定其相應(yīng)的值。 3．BDNF表達(dá)免疫組化測(cè)定采用sABC法。取上述切片，分別作常規(guī)免疫組化檢測(cè)BDNF陽性神經(jīng)元個(gè)數(shù)，陽性神經(jīng)元判斷標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞漿呈棕褐色。 4．TrKB表達(dá)免疫組化測(cè)定采用SABC法。取上述切片，分別作常規(guī)免疫組化檢測(cè)TrKB陽性神經(jīng)元個(gè)數(shù)，陽性神經(jīng)元判斷標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞漿呈黃

6、褐色。 5．檢測(cè)值統(tǒng)計(jì)處理的結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，SPSS11.0軟件包處理。 結(jié)果： 1．PD電針組大鼠治療后較治療前旋轉(zhuǎn)次數(shù)明顯減少(P<0.05)，模型組無變化(P>0.05)。 2．PD模型組右側(cè)黑質(zhì)SOD、GSH、GSH-Px均不同程度低于正常組(P<0.05、P<0.01、P<0.01)，電針使其有不同程度升高(P<0.01、P<0.01、P<0.05)。 3．PD模型組右

7、側(cè)黑質(zhì)BDNF明顯低于正常組、假手術(shù)組(P<0.01)，電針使其含量增加(P<0.05)。 4．PD模型組右側(cè)黑質(zhì)TrKB明顯低于正常組、假手術(shù)組(P<0.01)，電針使其含量增加(P<0.05)。 結(jié)論： BDNF不僅在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中對(duì)DA神經(jīng)元的生存、分化、生長(zhǎng)和維持神經(jīng)元正常的生理功能起關(guān)鍵作用，而且還具有抗傷害性刺激，促進(jìn)神經(jīng)元損傷后的再生等作用。氧化應(yīng)激反應(yīng)在PD發(fā)病中起著重要作用，可引起蛋白質(zhì)