基于TGF-β1-Smad3與EGF信號通路探討小承氣湯對模型大鼠“慢性支氣管炎”的藥物干預機制.pdf

1、目的：復制“慢性支氣管炎”模型大鼠，并同時給予治療組小承氣湯治療，選取時間點，同步觀察模型組和治療組大鼠的肺腸組織中的轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-β1）和受體（TGF-βR I）表達水平，以及表皮生長因子（EGF）和受體（ErbB3）表達水平，探索“肺病治腸”的藥物干預機制。
　　方法：取體重180～220g健康SD大鼠，雄性，共80只。按體重隨機分成空白對照（30只）、模型組（30只）、治療組（20只）。模型組采用改良煙熏法，復制“慢

2、性支氣管炎”模型。治療組大鼠于造模20d后開始灌胃治療，選用小承氣湯，每天1次。模型組、空白組隨機抽出10只，在造模開始后第20天、第50天、第70天處死；治療組隨機抽出10只，分別在造模后第50天和第70天處死。并在動物處死后當天，取相應標本檢測：左肺、胃、十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸和直腸，在光鏡下觀察病理形態(tài)學改變；對肺和結(jié)腸進行免疫組化染色，測量TGF-β1、TGF-βR I、Smad3、EGF、ErbB3表達水平。
　　結(jié)

3、果：
　　1.病理形態(tài)學觀察：造模后20天，解剖的模型組10只大鼠肺組織均出現(xiàn)支氣管上皮細胞廣泛地變性、壞死、脫落，局部支氣管粘膜伴有炎癥細胞浸潤；2只大鼠結(jié)腸組織局部充血水腫，病灶腸壁上皮細胞變性、壞死，可見炎細胞浸潤，少部分大鼠腸組織黏膜曾廣泛地糜爛，表明此時肺部病變已經(jīng)申入到腸組織；造模后50天，解剖的模型組10只大鼠肺組織均可見到肺組織結(jié)構(gòu)的病理形態(tài)學改變，支氣管上皮細胞曾顯廣泛地變性、壞死、脫落，伴大量炎細胞浸潤，少部分

4、大鼠支氣管管腔有炎性滲出，部分還伴有漿膜層出現(xiàn)炎細胞浸潤、滲出，肺間質(zhì)細胞結(jié)構(gòu)排列紊亂，呈纖維化改變，伴有少量的纖維修復細胞；70％的大鼠結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)有病理形態(tài)學的明顯改變，光鏡下可發(fā)現(xiàn)多處小灶性糜爛性病理灶，位于組織淺表處，上皮細胞變性、壞死、脫落，有炎細胞浸潤。腺體結(jié)構(gòu)不規(guī)則，有黏膜和黏膜下炎細胞浸潤；造模后70天，解剖的模型組10只大鼠肺組織均出現(xiàn)病理形態(tài)學改變，支氣管上皮細胞曾顯廣泛地變性、壞死、脫落，伴大量炎細胞浸潤，肺間質(zhì)內(nèi)

5、有炎細胞浸潤，40%的大鼠肺間質(zhì)結(jié)構(gòu)紊亂，呈纖維化改變，可見氣管腔內(nèi)炎性滲出內(nèi)有纖維修復細胞；100%大鼠的結(jié)腸組織全部出現(xiàn)病理形態(tài)學改變，腸黏膜多小灶性糜爛性病理灶并伴隱窩小膿腫，部分表現(xiàn)為灶性上皮細胞變性、壞死、脫落，腺體結(jié)構(gòu)不規(guī)則，有黏膜和黏膜下炎細胞浸潤和組織內(nèi)纖維結(jié)構(gòu)紊亂。造模后20天、50天、70天，胃、十二指腸、空腸、回腸、直腸標本未見異常病理形態(tài)學改變。造模后第50天、第70天，治療組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)清晰、完整，上皮細胞排

6、列整齊未見脫落，肺氣管、支氣管未見炎細胞浸潤；胃、腸組織，表面完整光滑，細胞排列完整清晰整齊，上皮細胞完整連續(xù)，腺體細胞排列規(guī)則，黏膜、固有膜內(nèi)血管、纖維結(jié)構(gòu)正常，無炎細胞浸潤
　　2.免疫組化：模型組與空白組比較：造模后第20天，模型組大鼠肺組織TGF-β1、TGF-βRI、Smad3、EGF、ErbB3表達升高；腸組織TGF-β1、EGF表達升高，Smad3表達顯著升高（p<0.05或p<0.01）。造模后第50天，模型組大鼠

7、肺組織TGF-βRI、ErbB3表達升高，TGF-β1、Smad3、EGF表達顯著升高；腸組織TGF-βRI表達升高，TGF-β1、Smad3、EGF、ErbB3表達顯著升高（p<0.05或p<0.01）。造模后第70天，模型組大鼠肺組織Smad3表達升高；腸組織ErbB3、TGF-βRI表達升高，TGF-β1、EGF表達顯著升高（p<0.05或p<0.01）。治療組與模型組比較：造模后50天，治療組大鼠肺組織TGF-β1、TGF-βR

8、I、Smad3、表達降低；腸組織EGF、ErbB3表達降低（p<0.05）。造模后70天，治療組大鼠肺組織EGF、ErbB3表達降低，TGF-β1、TGF-βRI、Smad3、EGF、ErbB3表達明顯降低；腸組織TGF-β1、TGF-βRI、Smad3、EGF、ErbB3表達降低，EGF、ErbB3表達明顯降低（p<0.05或p<0.01）。
　　結(jié)論：
　　1.慢性的肺部疾病容易引起大腸的病理改變，但“肺病及腸”是一個慢

9、性病理傳變過程，肺部的病變引起腸道的病變發(fā)生大約需要50天。
　　2．“肺病及腸”的病理傳變過程與轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-β）、通道蛋白smad3及表皮生長因子(EGF)有關(guān)。TGF-β1、EGF可能是“肺病及腸”的物質(zhì)基礎之一；TGF-β1/Smad3形成的信號通路系統(tǒng)，可能是“肺病及腸”病理傳變的信號通路之一。
　　3.在給予治療組小承氣湯治療后，在50天左右其肺、腸組織的 TGF-β、smad3、EGF等表達明顯下降，表