黃芩藥材的質(zhì)量控制研究.pdf

1、中藥材是一個復(fù)雜混合體系,其質(zhì)量好壞直接影響中藥材、中藥飲片和中成藥的臨床療效。采收期和采收年限是影響中藥材質(zhì)量的第一關(guān),怎樣確定中藥材的適宜采收期和采收年限一直是中藥領(lǐng)域的研究重點和熱點。黃芩是我國中醫(yī)臨床常用大宗藥材品種之一,其化學(xué)成分非常復(fù)雜,如果只研究其個別成分,并以此作為評價黃芩質(zhì)量的依據(jù),就不能反映出藥材內(nèi)所有組分的整體協(xié)同作用。本文以黃芩作為研究對象,采用紅外光譜三級鑒別法(傅里葉變換紅外光譜、二階導(dǎo)數(shù)紅外光譜和二維相關(guān)紅

2、外光譜)對不同采收期和不同年限黃芩的整體信息進(jìn)行了分析和鑒定,并通過主成分分析法對大量的黃芩樣品進(jìn)行采收季節(jié)區(qū)分,從而鑒別出不同采收期和不同年限的黃芩。
　　藥材保質(zhì)期的研究也是中藥質(zhì)量控制的環(huán)節(jié)之一。目前,沒有相應(yīng)的國家標(biāo)準(zhǔn)對黃芩的貯存時間進(jìn)行規(guī)定,導(dǎo)致已保存多年的黃芩仍然在市場上流通使用,這些藥材可能產(chǎn)生霉變,蟲蛀,變色等變質(zhì)現(xiàn)象,使藥材品質(zhì)降低,影響其安全性和有效性。只有科學(xué)有效的控制藥材保質(zhì)期,才能得到效果好、質(zhì)量高的中藥

3、材。本實驗采用加速試驗法對不同貯藏期黃芩的成分變化進(jìn)行研究,為以后進(jìn)一步研究黃芩貯藏期提供試驗依據(jù)。本文還對室溫條件下貯藏的黃芩進(jìn)行研究,以期為黃芩的保質(zhì)期提供指導(dǎo)。
　　目的:
　　1、用紅外光譜三級鑒別法和主成分分析法分析不同采收期黃芩的成分變化,快速鑒別出不同采收期的黃芩,為黃芩的采收及相關(guān)產(chǎn)業(yè)提供科學(xué)依據(jù)。
　　2、采用紅外光譜三級鑒別法分析不同年限黃芩成分的動態(tài)變化,以鑒別黃芩的采收年限,為以后臨床用藥打下基

4、礎(chǔ)。
　　3、通過加速試驗法研究黃芩的貯藏穩(wěn)定性,以紅外光譜法三級鑒別法和高效液相色譜法(HPLC-DAD)分析黃芩藥材的整體變化和局部變化,初步研究貯藏時間對黃芩質(zhì)量的影響。
　　4、在加速試驗的基礎(chǔ)上,采用紅外光譜法(FTIR)法和高效液相色譜-質(zhì)譜法(HPLC-DAD-MS)進(jìn)一步研究室溫條件下黃芩的貯藏穩(wěn)定性,從而為黃芩藥材保質(zhì)期的建立提供參考依據(jù)。
　　方法:
　　1、選用溴化鉀壓片法制樣,得到一維紅外

5、光譜圖,再將樣品藥片裝入程序控制變溫附件,從50~120℃,每隔10℃測試樣品的紅外光譜,得到在熱微擾下樣品的二維相關(guān)紅外光譜。
　　2、采用Agilent XDB-C18柱(2.1mm×150mm,3.5μm);1％冰醋酸水溶液﹑乙腈為流動相,進(jìn)行線性梯度洗脫;檢測波長276nm;流速0.2mL·min-1;柱溫25℃;進(jìn)樣量2μL。
　　3、采用HPLC-DAD-MS/MS電噴霧負(fù)離子模式進(jìn)行掃描,得到質(zhì)譜數(shù)據(jù),選用Ag

6、ilent XDB-C18柱(2.1mm×150mm,3.5μm);0.1%甲酸水溶液、乙腈為流動相,進(jìn)行線性梯度洗脫;檢測波長276nm;流速0.2mL·min-1;柱溫25℃;進(jìn)樣量2μL。
　　結(jié)果:
　　1、春季和秋季采收藥材紅外光譜的峰位置有一定差別,春季酯類峰和黃酮類峰的相對峰強度分別在0.38和0.94以上,秋季分別在0.3和0.9以下。二者的差異在二階導(dǎo)數(shù)譜及二維相關(guān)紅外光譜上更加直觀顯著。另外,黃芩紅外光譜

7、主成分分析可快速準(zhǔn)確地判別大量黃芩樣本的采收季節(jié)。
　　2、研究發(fā)現(xiàn)一年生和三年生的10個樣本譜圖有較大差異,二年生10個樣本譜圖比較相似;二年生的酯類C=O特征吸收峰1740cm-1強于一年生和三年生,三年生的黃酮類成分特征吸收峰1614 cm-1強于一年生和二年生。另外,不同年限1058cm-1糖苷吸收峰的峰形不同。二維相關(guān)紅外光譜中,不同年限黃芩的最強自動峰位置也不同。
　　3、加速試驗條件下,通過紅外光譜三級鑒別分析

8、法可知不同貯藏期黃酮吸收峰(1658,1614cm-1)和糖類吸收峰(1069cm-1)的峰強、峰形、峰位置變化十分明顯;貯藏0、1、2和3個月黃芩的相關(guān)系數(shù)分別為1,0.9670,0.8570和0.7308。HPLC測得隨著貯藏時間的推移,黃芩苷和漢黃芩苷含量下降,黃芩素和漢黃芩素的含量是先增加后減少。
　　4、不同貯藏期黃芩紅外光譜的譜峰的位置、性狀和強度基本一致,6個化學(xué)成分被確定,不同貯藏期成分含量基本穩(wěn)定,無明顯變化。<

9、br>　　結(jié)論:
　　1、春季采收的黃芩黃酮類、酯類成分高于秋季,春季和秋季采收的黃芩所含糖類物質(zhì)也不同。黃芩紅外光譜主成分分析可快速準(zhǔn)確地判別大量黃芩樣本的采收季節(jié)。紅外光譜三級鑒別法與主成分分析相結(jié)合,可以為不同采收期中藥的鑒別和研究提供簡便有效的分析方法。
　　2、一年生和三年生黃芩不穩(wěn)定,二年生較穩(wěn)定。二年生黃芩酯類物質(zhì)含量最高,三年生黃芩黃酮類最高。因此,不同年限黃芩藥材所含成分及含量不盡相同,用藥應(yīng)根據(jù)藥材年限調(diào)