中藥免疫調(diào)節(jié)劑對(duì)IDDM發(fā)病的干預(yù)及機(jī)制研究.pdf

1、本研究的目的是建立鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的1型糖尿病(IDDM)動(dòng)物模型；探討免疫調(diào)節(jié)劑人工蟲草(PHC)的體內(nèi)干預(yù)作用及機(jī)制；體外培養(yǎng)脾臟來源的小鼠T淋巴細(xì)胞，探討PHC的體外免疫干預(yù)作用及機(jī)制。 方法：健康雌性Wistar大鼠，禁食不禁水12h后，一次性腹腔注射50mg/kgSTZ溶液，建立大鼠IDDM模型；健康雄性Balb/c小鼠，正常飲食，每天腹腔注射40mg/kgSTZ溶液，連續(xù)5d，建立小鼠IDDM模型；在模型建立

2、7d前，分組灌胃給予動(dòng)物高(75mg/kg)、中(50mg/kg)和低(25mg/kg)三個(gè)劑量PHC混懸液，陽性對(duì)照組灌胃給予鹽酸二甲雙胍溶液(60mg/kg)，連續(xù)給藥28d。自造模起，每天測(cè)量動(dòng)物尿糖、體重、飲水量和觀察墊料潮濕情況，每周測(cè)血糖值，第28d處死動(dòng)物取胰腺進(jìn)行HE染色及免疫組化檢測(cè)，取血清進(jìn)行超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、總甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)和糖化血清蛋白(GSP)值檢測(cè)以及血清白細(xì)胞介

3、素-2(IL-2)、IL-10和胰島素抗體(IAA)檢測(cè)。體外培養(yǎng)脾臟來源的小鼠T淋巴細(xì)胞，MTT法檢測(cè)PHC對(duì)T淋巴細(xì)胞的免疫干預(yù)作用，同時(shí)取培養(yǎng)液上清，ELISA法測(cè)定IL-2、IL-10含量。 結(jié)果：STZ誘導(dǎo)的IDDM動(dòng)物模型可以穩(wěn)定持續(xù)28d以上，病理表現(xiàn)為典型胰島炎；PHC中、低劑量可顯著降低自身免疫性糖尿病動(dòng)物的高血糖，抑制細(xì)胞免疫反應(yīng)，降低血清及培養(yǎng)上清液中IL-2水平，減輕胰腺炎性細(xì)胞浸潤，高劑量PHC控制血糖