32P敷貼對幼鼠局部皮膚及遠(yuǎn)處組織器官(皮膚、脾臟)損傷的研究.pdf

1、目的：32P同位素敷貼是一種簡易的皮膚短距離放射治療方法，臨床上較廣泛使用于包括嬰幼兒在內(nèi)的群體，但其安全性一直存在爭議。目前關(guān)于同位素敷貼治療對機(jī)體損傷及影響的研究主要集中于成人，而對于幼齡群體者則相當(dāng)匱乏;研究也多局限于敷貼局部組織，而對于機(jī)體遠(yuǎn)處組織臟器的研究卻很少，對臨床指導(dǎo)意義有限。為進(jìn)一步研究32P同位素敷貼在嬰幼兒中使用的安全性，我們采用臨床上32P敷貼治療的方法，建立SD幼鼠32P敷貼模型，從外觀及組織DNA損傷角度檢測

2、32P敷貼對幼齡SD大鼠局部皮膚及遠(yuǎn)處組織器官的損傷及影響。
　　方法：⑴參考臨床方法，利用32P溶液及濾紙，制作簡易32P敷貼器，貼敷于鼠齡6天的SD幼鼠背部皮膚。對照組使用生理鹽水替代32P溶液。⑵采用不同活度（0μCi、5μCi、25μCi、125μCi），分別作用6h\24h\96h。提取靶器官組織總蛋白，使用western blotting檢測局部皮膚、遠(yuǎn)處皮膚（距敷貼邊緣0.5cm以外）及脾臟組織DNA損傷應(yīng)答蛋白總體

3、磷酸化水平，探討敷貼對SD幼鼠局部及遠(yuǎn)處組織DNA損傷水平。⑶敷貼24h后，至中、大劑量可見局部皮膚隨劑量增加顏色逐漸變紅，甚至變蒼白。⑷敷貼96h再觀察半月，各劑量組局部皮毛生長明顯受到抑制，并出現(xiàn)放射性皮炎，且呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系，對照組則未見損傷表現(xiàn)。⑸敷貼96h后觀察1個月，各劑量組局部皮毛一定程度的恢復(fù)，但高劑量組后背變形仍存在，且部分實驗鼠還出現(xiàn)會陰部潰爛、后肢癱瘓，死亡等并發(fā)癥，對照組未見損傷表現(xiàn)。⑹高劑量組敷貼96h，次月重

4、復(fù)一次，觀察3個月后可見會陰潰爛更加明顯，下肢癱瘓、活動受限，還可見部分鼠死亡。⑺32P敷貼各劑量組ATM、PATM表達(dá)水平均較對照組明顯增高(P＜0.05)。⑻各組ATM磷酸化比值（PATM/ATM）也均明顯高于對照組(P＜0.01)，并隨劑量率增高而增高，呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性(P＜0.01)。⑼與對照組相比，各劑量組P53磷酸化比值(PP53/P53)均明顯增高(P＜0.05)。⑽作用6h后，P53磷酸化比值各劑量組間無統(tǒng)計學(xué)差異(

5、P＞0.05);作用24h后，在0-25μ Ci，呈現(xiàn)劑量依賴性(P＜0.01)，繼續(xù)增加至125μ Ci時反稍有下降;作用96h后，則呈現(xiàn)明顯劑量依賴性(P＜0.01)。⑾與對照組相比，ATM、pATM表達(dá)水平均升高(P＜0.05)。⑿敷貼6h后，ATM磷酸化比值在125μCi始明顯增高(P＜0.05);敷貼24h\96h后，ATM磷酸化水平均較對照組明顯升高(P＜0.01)，且呈現(xiàn)明顯的劑量依賴關(guān)系(P＜0.01)。⒀各劑量組OTM

6、較生理鹽水組均有不同程度的增高(P＜0.05)。⒁敷貼6h\24h后，在0-25μCi范圍，OTM隨著輻射劑量強(qiáng)度的增加而增加(P＜0.05);在敷貼96h后，OTM隨劑量增加呈現(xiàn)上升趨勢。⒂與對照組相比，各劑量組P53、磷酸化P53，H2AX、磷酸化H2AX表達(dá)水平均明顯升高(P＜0.05)。⒃各劑量組H2AX磷酸化比值（PH2AX/H2AX）均明顯高于對照組(P＜0.05)，并隨劑量增加呈上升趨勢;敷貼96h后，最為顯著(P＜0.0

7、1)，且在0μCi-25μCi時呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系(P＜0.05)，繼續(xù)增至125μCi時反稍下降。⒄除6h組5μCi， P53磷酸化比值(pP53/P53)明顯高于對照組(P＜0.05)，且96h隨劑量升高而升高(P＜0.01)。
　　結(jié)論：①32P敷貼對SD幼鼠局部皮膚DNA的損傷，呈現(xiàn)放射強(qiáng)度（劑量率）依賴性，損傷程度隨放射強(qiáng)度的增加而增加。②32P敷貼對SD幼鼠遠(yuǎn)處皮膚DNA的損傷，也與劑量率的增加有關(guān)。③脾臟DNA損傷:在