四種果仁活性成分的研究.pdf

1、杏仁、榛子、山核桃、松籽在分類上屬于堅果中的樹堅果，在我國種植面積廣、產量高、也是在國際上享有盛譽的果仁品種。杏仁、榛子、山核桃、松籽的營養(yǎng)價值高，生理、藥理活性明確，經濟價值高，隨著我國經濟樹種的開發(fā)，樹堅果的種植面積還將大幅度提高。因此深入研究它們的活性成分具有重要意義。 目前對果仁的研究比較集中于果仁油脂這方面。本實驗采用目前應用較廣的冷浸法、超聲清洗法、超臨界流體萃取法提取果仁油脂并進行了比較研究。結果顯示，三種方法對果

2、仁油脂的提取率由高到低依次為：超臨界流體萃取法>超聲清洗法>冷浸法。四種果仁含油率的高低依次為：松籽>山核桃>杏仁>榛子。另外，用正交分析法優(yōu)化了超聲清洗法提取果仁油脂的工藝。在選定的因素中，最活躍的影響因素是溶劑，其次是料液比，最小的影響因素是時間。最后確定松籽的最佳提取工藝為：以石油醚為溶劑，料液比1:10，超聲提取時間為40min；杏仁：以石油醚為溶劑，料液比1:8，超聲提取時間為30min；山核桃：以正己烷為溶劑，料液比1:10

3、，超聲提取時間為40min；榛子：以正己烷為溶劑，料液比1:10，超聲提取時間為30min。應用GC/MSX寸四種果仁油脂的脂肪酸組成進行了分析，結果表明：四種果仁的脂肪酸組成有很大差異，但是均含有9-十八碳烯酸甲酯和9，12-十八碳二烯酸甲酯，且含量都很高。 杏仁肽是杏仁蛋白質經酶水解、精制后所得到的短肽混合物。本研究以脫脂杏仁為原料，經蛋白質提取、酶解、分離等過程制備有生物活性的杏仁蛋白質多肽。杏仁經攪拌、調pH值、離心等一

4、系列過程，分離出杏仁蛋白質。分別用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶對其進行水解，以水解度為指標，確定木瓜蛋白酶為最佳酶制劑。通過單因素試驗和正交試驗確定了木瓜蛋白酶的最佳水解條件：pH值為11.3，底物濃度為30mg/mL，酶與底物比為6.5％，溫度60℃，水解時間2h，可以得到水解度為65％的杏仁肽。本實驗采用凝膠色譜法分離多肽，凝膠型號為SephadexG-25，洗脫液為pH值8.5的Tris-HCl，洗脫速度為2ml/4min，收

5、集各管洗脫液，加入靠馬斯亮藍G-250，在595nm下檢測各管吸光度，作洗脫曲線。根據測得內水體積、外水體積，排除大分子量的洗脫峰和分子量約為單個氨基酸的洗脫峰，則中間部分為分子量為5000左右的多肽混合物。此多肽混合物再經過濃縮、干燥即成為成品。 應用凱氏定氮法測定果仁中的蛋白質含量，結果為：山核桃>杏仁>松籽>榛子；蒽酮比色法測定果仁中可溶性總糖含量，結果為：杏仁>山核桃>松籽>榛子；DNFB柱前衍生化RP-HPLC法測定果

6、仁中氨基酸，測得果仁中含有豐富的氨基酸，其種類至少有16種，且必需和半必需氨基酸的含量很高；用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀及火焰原子吸收法對果仁中的Sr、Ti、Mn、Mo、V、Zn、Cr、Fe、Co、Cu、Ni、Al、B、Ca、Mg、Ba、Be、Cd、La、P、Pb、Y、K、Na等24種微量元素進行了檢測；用索氏提取法提取苦杏仁苷并采用二次重結晶的方法提純苦杏仁苷，苦杏仁苷含量為3.13％；用水蒸氣蒸餾法提取杏仁精油，精油得率1.85％，