四種靈芝科真菌和硬柄小皮傘的化學(xué)成分及生物活性研究.pdf

1、本論文對(duì)靈芝科Ganodermataceae假芝屬Amauroderma廈門(mén)假芝(Amaurodermaamoiensis)、雞冠孢芝屬Haddowia長(zhǎng)柄雞冠孢芝（Haddowia longipes）以及靈芝屬Ganoderma黃邊靈芝（Ganoderma luteomarginatum）和熱帶靈芝（Ganoderma tropicum）四種野生藥用靈芝及硬柄小皮傘進(jìn)行了化學(xué)成分的分離鑒定及生物活性評(píng)價(jià)。運(yùn)用減壓柱層析、反相柱層析、硅

2、膠柱層析、葡聚糖凝膠柱層析等色譜分離技術(shù)，并結(jié)合一維、二維核磁共振技術(shù)以及紅外、紫外、質(zhì)譜等現(xiàn)代波譜技術(shù)，從上述材料中共分離鑒定了單體化合物121個(gè)，其中新化合物26個(gè)，結(jié)構(gòu)類(lèi)型涉及三萜、甾體、倍半萜、生物堿等，并對(duì)這些天然產(chǎn)物進(jìn)行了抗腫瘤和神經(jīng)保護(hù)等生物活性的研究。本文主要研究結(jié)果如下:
　　1.通過(guò)各種色譜技術(shù)，從廈門(mén)假芝子實(shí)體乙醇提取物中分離得到25個(gè)單體化合物，其中，有兩個(gè)新化合物分別為:聚合物amauroamoienin

3、和倍半萜化合物amoienacid。采用MTT法對(duì)部分化合物進(jìn)行了體外抗腫瘤活性測(cè)定，發(fā)現(xiàn)4-hydroxy-17-methylincisterol、ergosterol peroxide、(22E,24R)-ergosta-8,22E-diene-3β,5α,6β,7α-tetraol、22E-7α-methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol、1,5-dihydroxy-6'，6'-d

4、imethylpyrano[2'，3':3，2]xanthone和jacareubin對(duì)腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出抑制活性。采用2種體外抑制酶乙酰膽堿酯酶(AChE)和丁酰膽堿酯酶(BuChE)對(duì)部分單體化合物膽堿酶抑制活性篩選結(jié)果表明，(17R)-17-methylincisterol和jacareubin具有兩種膽堿酯酶雙重抑制活性。
　　2.從長(zhǎng)柄雞冠孢芝子實(shí)體乙醇提取物中分離得到29個(gè)單體化合物，其中，有11個(gè)新化合物分別鑒定為:11

5、-oxo-ganoderiol D， lanosta-8-en-7，11-dioxo-3β-acetyloxy-24,25,26-trihydroxy,lanosta-8-en-7-oxo-3β-acetyloxy-11β,24,25,26-tetrahydroxy,lanosta-7,9(11)-dien-3β-acetyloxy-24,25,26-trihydroxy,lanosta-7,9(11)-dien-3β-acetylox

6、y-24,26-dihydroxy-25-methoxy,11-oxo-lucidadiol,11β-hydroxy-lucidadiol,lucidone H,lanosta-7,9(11),24E-trien-3β-acetyloxy-26,27-dihydroxy,(22E,24R)-6-methoxyergosta-7，9(11)，22-triene-3β，5α-diol， methyl sinensine E。對(duì)部分化合物進(jìn)行

7、了體外抗腫瘤活性測(cè)定，發(fā)現(xiàn)化合物lanosta-8-en-7-oxo-3β-acetyloxy-11β，24，25,26-tetrahydroxy、lanosta-7,9(11)-dien-3β-acetyloxy-24,25,26-trihydroxy、lanosta-7,9(11)-dien-3β-acetyloxy-24，26-dihydroxy-25-methoxy和11-oxo-lucidadiol對(duì)腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出抑制活性。A

8、ChE抑制活性篩選結(jié)果表明，11-oxo-ganoderiol D、lanosta-8-en-7,11-dioxo-3β-acetyloxy-24,25,26-trihydroxy、lanosta-8-en-7-oxo-3β-acetyloxy-11β,24,25,26-tetrahydroxy、 lanosta-7,9(11)-dien-3β-acetyloxy-24,25,26-trihydroxy、11β-hydroxy-luci

9、dadiol、lucidone H、ganoderiol D、lanosta-8-en-7-one-3β-acetyloxy-24,25,26-trihydroxy、 ganodermanondiol、lucidumol B、lucidadiol、lucidadoneA、lanosta-7，9(11)，24E-trien-26-al-3-oxo具有抑制活性，且含有共軛體系O=C7-C8=C9-O=C11的三萜比含有兩個(gè)雙鍵的共軛體系C7

10、=C8-C9=C11的三萜抑制活性更強(qiáng)。對(duì)2個(gè)靈芝生物堿類(lèi)化合物sinensine D和methyl sinensine E抗炎抗敏相關(guān)活性初步篩選測(cè)試結(jié)果表明，兩者對(duì)肥大細(xì)胞脫顆粒的抑制率分別達(dá)到55.06％和51.80％。
　　3.從黃邊靈芝子實(shí)體乙醇提取物中分離得到38個(gè)單體化合物，其中，有8個(gè)新的靈芝三萜化合物，分別為:lanosta-7，9(11)-dien-3β-acetyloxy-24，25-dihydroxy,la

11、nosta-7,9(11)-dien-24,26-dihydroxy-25-methoxy,lanosta-7,9(11)-dien-3β,24,26-trihydroxy-25-methoxy, lanosta-8,24E-dien-7-oxo-3β-acetyloxy-26-hydroxy,lanosta-8,24E-dien-7-oxo-3β-acetyloxy-26-al,lanosta-7,9(11),24-trien-3β-

12、acetyloxy-26-hydroxy，methyl Ganoderate A1，methyl Ganoderate A2。對(duì)部分化合物進(jìn)行了體外抗腫瘤活性測(cè)定，發(fā)現(xiàn)化合物lanosta-7，9(11)-dien-3β-acetyloxy-24，25-dihydroxy、lanosta-7，9(11)-dien-24,26-dihydroxy-25-methoxy、lanosta-7,9(11)-dien-3β,24,26-trihy

13、droxy-25-methoxy、 ganoderiol A、ganoderiol F、lucidumol A、5α-lanosta-7,9(11),24-triene-3β-hydroxy-26-al和calvasterol B對(duì)腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出抑制活性，且多數(shù)有抗腫瘤活性的化合物具有兩個(gè)雙鍵的共軛體系C7=C8-C9=C11的骨架特征。對(duì)部分單體化合物AChE抑制活性篩選結(jié)果表明，化合物lanosta-7，9(11)，24-trien

14、-3β-acetyloxy-26-hydroxy、methyl ganoderate A2、ganodermadiol、26-hydroxy-ganodermanondiol具有弱的抑制活性。
　　4.從熱帶靈芝子實(shí)體乙醇提取物中的正丁醇部分分離出3個(gè)新的靈芝三萜成分，分別鑒定為ganotropic acid，3β，7β，15α，24-tetra-hydroxy-11，23-dioxo-lanost-8-en-26-oic aci

15、d和3β,7β,15α,28-tetra-hydroxy-11,23-dioxo-lanost-8,16-dien-26-oic acid，其中g(shù)anotropic acid的側(cè)鏈上形成了獨(dú)特的兩個(gè)含氧五元環(huán)。對(duì)3個(gè)新化合物進(jìn)行了體外抗腫瘤活性、抗金黃色葡萄球菌以及AChE抑制活性測(cè)定，發(fā)現(xiàn)三者均無(wú)上述生物活性。
　　5.通過(guò)對(duì)四種靈芝科真菌的化學(xué)成分比較發(fā)現(xiàn)，廈門(mén)假芝中不合靈芝三萜類(lèi)成分，這可能是假芝屬區(qū)分于靈芝屬的重要化學(xué)特性

16、。黃邊靈芝和長(zhǎng)柄雞冠孢芝的化學(xué)成分高度相似，推斷長(zhǎng)柄雞冠孢芝和黃邊靈芝具有較近的親緣性，或是由親緣更近的共同祖先類(lèi)群進(jìn)化而來(lái)，對(duì)兩者的ITS4&5序列分析發(fā)現(xiàn)，前者GC含量為48.4％，序列長(zhǎng)度為692 bp，后者GC含量為45.9％，序列長(zhǎng)度為634 bp。長(zhǎng)柄雞冠孢芝中含有靈芝三萜類(lèi)成分，但未發(fā)現(xiàn)靈芝酸成分，這可能是區(qū)分雞冠孢芝屬與靈芝屬的特征成分。
　　6.從硬柄小皮傘子實(shí)體乙醇提取物中分離得到26個(gè)單體化合物，其中，有兩個(gè)