血細(xì)胞X染色體失活偏移與女性肺癌、食管癌的早期發(fā)生有關(guān).pdf

1、女性體細(xì)胞組織是由來(lái)自父系、母系兩類(lèi)細(xì)胞構(gòu)成的嵌合體，部分細(xì)胞中父本X染色體有活性，其余細(xì)胞中母本X染色體有活性。理論上，有活性的父本X染色體連鎖基因與有活性的母本X染色體連鎖基因的數(shù)量應(yīng)為1∶1；這一比率發(fā)生顯著偏差，稱(chēng)為X染色體失活偏移(skewedX-chromosomeinactivation，SXCI)。臨床流行病學(xué)資料已經(jīng)顯示，血細(xì)胞SXCI與女性卵巢癌、乳腺癌早期發(fā)生有顯著關(guān)聯(lián)。然而，非腫瘤患者及用作對(duì)照的健康個(gè)體也可以發(fā)

2、生SXCI。來(lái)源于不同實(shí)驗(yàn)室的數(shù)據(jù)則報(bào)道了不同的SXCI發(fā)生率。目前還未見(jiàn)到有關(guān)中國(guó)健康女性個(gè)體SXCI發(fā)生率的報(bào)道。 本課題擬了解健康中國(guó)女性個(gè)體SXCI的發(fā)生狀況，并明確年齡因素是否與之關(guān)聯(lián)；檢測(cè)女性肺癌、食管癌患者血細(xì)胞X染色體失活模式以及SXCI發(fā)生，觀察SXCI與女性肺癌、食管癌發(fā)生的關(guān)系；進(jìn)一步探討這項(xiàng)基于分析血細(xì)胞的X染色體基因多態(tài)性的檢測(cè)技術(shù)成為篩查惡性腫瘤高危個(gè)體方法的可能；本課題亦研究了中國(guó)健康女性雄激素受體

3、(AR)基因的CAG短串聯(lián)重復(fù)序列(short-tandemrepeat，STR)的重復(fù)次數(shù)n值的分布范圍，初步探討了女性食管癌與AR基因的CAGSTR重復(fù)數(shù)目之間的關(guān)系。 本研究采集了401例女性參照個(gè)體、148例女性肺癌患者以及143例食管癌患者的外周血標(biāo)本，提取基因組DNA，經(jīng)HpaⅡ消化后，擴(kuò)增AR基因，產(chǎn)物經(jīng)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，銀染顯示結(jié)果，比較HpaⅡ消化前后AR基因擴(kuò)增產(chǎn)物的強(qiáng)度差異，計(jì)算其校正比值(CR)；亦

4、應(yīng)用PCR-變性聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)，對(duì)367例女性參照者以及143例女性食管癌患者進(jìn)行了AR基因的CAGSTR長(zhǎng)度的比較。 結(jié)果顯示： 1)健康女性個(gè)體被劃分為新生兒組(年齡均在4周以?xún)?nèi)，n=46)、青年組(年齡區(qū)間16～50歲，中位年齡41歲，n=166)以及老年組(年齡區(qū)間51～96歲，中位年齡73歲，n=144)。采用標(biāo)準(zhǔn)CR≥23或≥10時(shí)，受試個(gè)體的整體SXCI發(fā)生率分別為14.6％(52/356)或5.3

5、％(19/356)。采用標(biāo)準(zhǔn)CR≥3時(shí)，新生兒組、青年組以及老年組的健康女性SXCI發(fā)生率有顯著差別(相似率檢驗(yàn)，P＜0.001)；組間比較顯示，新生兒組為4.3％(2/46)(P=0.532vs青年組)，青年組為7.8％(13/166)(P＜0.05vs老年組)，老年組為25.7％(37/144)(P＜0.05vs新生兒組)，老年組SXCI發(fā)生率顯著高于新生兒組或青年組，而新生兒組與青年組之間差異不顯著。采用CR≥10這一標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，新生

6、兒組、青年組和老年組SXCI發(fā)生率分別為2.2％(1/46)、1.2％(2/166)和11.1％(16/144)，老年組SXCI發(fā)生率仍顯著高于新生兒組或青年組(P值均小于0.05)，而新生兒組與青年組之間差異并不顯著。 上述健康成年女性可以進(jìn)一步被劃入16～30歲、31～50歲、51～70歲、71～96歲年齡區(qū)間，相應(yīng)SXCI(CR≥3)發(fā)生率分別為4.9％(3/61)、9.5％(10/105)、10.8％(7/65)和38.

7、0％(30/79)。SXCI(CR≥3)發(fā)生率隨年齡的增加而升高(相似率檢驗(yàn)，P＜0.001)。71～96歲年齡區(qū)間的女性SXCI發(fā)生率較之其他任一區(qū)間均顯著為高(P＜0.05)。 2)采用CR≥10作為SXCI標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，50歲以下的肺癌患者SXCI發(fā)生率高于相同年齡段的參照對(duì)象(分別為7.9％和1.2％，P=0.046)；50歲以上肺癌患者SXCI發(fā)生率(4.5％)和相同年齡段的參照對(duì)象SXCI發(fā)生率(5.4％)無(wú)顯著差別(P=

8、0.488)。無(wú)論采用CR≥3抑或≥10為標(biāo)準(zhǔn)，女性肺癌患者中發(fā)生SXCI者的平均年齡均比未發(fā)生SXCI者提前10歲以上(P值均小于0.05)。3)以CR≥3為標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，50歲以下(含50歲)年輕食管癌患者SXCI發(fā)生率(35.7％)顯著高于相應(yīng)參照組SXCI發(fā)生率(7.6％)(P=0.006)。無(wú)論采用CR≥3或≥10作為判斷標(biāo)準(zhǔn)，50歲以上的食管癌患者組和參照組的SXCI發(fā)生率均無(wú)顯著差異(CR≥3，分別為6.7％和10.4％，P=0

9、.301；CR≥10，分別為5.0％和5.2％，P=0.940)。患者組發(fā)生SXCI(CR≥3)和未發(fā)生SXCI(CR＜3)者的平均年齡分別為43.42±7.69歲和59.97±14.93歲，前者比后者小16歲以上，二者差異顯著(P＜0.01)。 4)女性參照組上、下帶CAGSTRn值范圍分別為15～34(24.38±3.90)和14～34(23.76±3.62)。女性食管癌組的上、下帶CAGSTRn值范圍分別為9～30(21.

10、57±4.83)和9～27(20.70±4.15)。這樣兩組的CAGSTR重復(fù)次數(shù)的平均水平有顯著差異(按上帶比較，F(xiàn)=46.432，P=0；按下帶比較F=67.515，P=0)，食管癌患者的CAGSTR重復(fù)次數(shù)的平均水平明顯短于對(duì)照組。 以上數(shù)據(jù)證實(shí)，健康中國(guó)女性SXCI發(fā)生率是隨年齡的增長(zhǎng)而增高的，年齡與女性個(gè)體SXCI的發(fā)生相關(guān)；女性血細(xì)胞SXCI與肺癌、食管癌的早期發(fā)生有關(guān)；食管癌的發(fā)生與AR基因的CAGSTR重復(fù)次數(shù)有