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文檔簡介
1、目的:通過高強度聚焦超聲不完全消融篩選殘留肝癌細胞亞系,探討其生物學行為改變及其對血管形成的影響。
方法:在聲功率5W下,HIFU消融肝癌細胞懸液,獲得相應的溫度-時間曲線,通過細胞活力檢測實驗篩選出最佳溫度下的不完全消融肝癌細胞亞系,繼續(xù)培養(yǎng)獲得穩(wěn)定子代。細胞活力實驗檢測細胞增殖活力及熱耐受性,肝癌細胞遷移和侵襲能力的變化通過劃痕實驗和Transwell小室侵襲實驗鑒別;通過檢測內(nèi)皮細胞活力、遷移能力及管腔成形能力了解肝癌細
2、胞亞系對內(nèi)皮細胞的影響,并通過 RT-PCR和Western-Blot檢測肝癌細胞亞系VEGF mRNA和蛋白的表達量。
結果:隨著HIFU消融時間增加, SMMC7721肝癌細胞懸液溫度增加,細胞死亡率增加,在45℃-47℃之間,肝癌細胞死亡率逐漸增加,而殘留的肝癌細胞能存活并繼續(xù)增殖,在48℃及以上溫度肝癌細胞在24h內(nèi)全部死亡,從而得到生存界限溫度閾值47℃,此溫度下篩選出的SMMC7721肝癌細胞亞系增殖率、熱耐受性較
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