苦豆子提取物對(duì)腸癌細(xì)胞株受體酪氨酸激酶EphA1的影響.pdf

1、目的：
　　探討苦豆子提取物對(duì)人腸癌細(xì)胞株HCT-116的抗增殖及誘導(dǎo)凋亡的效果，及其對(duì)受體酪氨酸激酶家族成員EphA1基因表達(dá)的影響，為中醫(yī)藥進(jìn)一步提高治療腸癌療效提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　使用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法，加入終濃度分別為：0.6mg/mL，0.9mg/mL，1.2mg/mL，1.5mg/mL，1.8mg/mL，2.1mg/mL的苦豆子提取物，計(jì)算細(xì)胞生長抑制率，測(cè)定IC50值；分別用1.2mg

2、/mL，1.5mg/mL苦豆子提取物及空白培養(yǎng)基處理48小時(shí)后，使用流式細(xì)胞法(FCM)檢測(cè)苦豆子提取物對(duì)人腸癌HCT116細(xì)胞生長抑制和誘導(dǎo)凋亡作用；Western Blot檢測(cè)EphA1基因蛋白的表達(dá)，處理組給予苦豆子提取物IC50濃度，即1.2mg/ml，分別于48及72小時(shí)收集細(xì)胞，提取細(xì)胞總蛋白，抗體孵育后，于成像系統(tǒng)上檢測(cè)蛋白條帶，用Quantity one軟件進(jìn)行蛋白條帶灰度分析。并進(jìn)行相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：<

3、br>　　1.不同濃度苦豆子提取物作用于人腸癌細(xì)胞株 HCT116后，與對(duì)照組比較細(xì)胞生長明顯受到抑制(P<0.05)，其 IC50為1.2mg/ml，并有良好的量效關(guān)系；
　　2.流式細(xì)胞法顯示，細(xì)胞凋亡百分率隨著藥物作用濃度的增加而增加；
　　3.Western blot實(shí)驗(yàn)顯示苦豆子提取物分別作用于HCT116細(xì)胞48h，72h EphA1的蛋白表達(dá)隨著苦豆子提取物作用時(shí)間的延長，出現(xiàn)了先增高，后降低的表達(dá)趨勢(shì)。不同時(shí)