加味桂枝茯苓顆粒對(duì)大鼠前列腺增生組織中bcl-2、bax基因調(diào)控的研究.pdf

1、目的:通過(guò)對(duì)加味桂枝茯苓顆粒對(duì)大鼠前列腺增生組織中bcl-2、bax基因調(diào)控的研究，探討加味桂枝茯苓顆粒對(duì)良性前列腺增生癥的作用機(jī)制，為中醫(yī)中藥治療良性前列腺增生癥提供理論及相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)支持。
　　方法:取清潔級(jí)雄性SD大鼠90只，隨機(jī)分為對(duì)照組25只，模型組65只。使用氯胺酮注射液（100mg/kg）經(jīng)腹腔注射麻醉，無(wú)菌條件下，采用陰囊切口，將睪丸及其附屬組織充分游離并切除雙側(cè)睪丸，縫合陰囊皮膚，置于清潔鼠籠內(nèi)，1周后大鼠自然恢

2、復(fù)。然后給予正常組大鼠生理鹽水0.1ml/只，皮下注射，每日1次;模型組大鼠給予溶于橄欖油的丙酸睪丸酮5mg/kg，頸背部皮下注射;21天后分別隨機(jī)取正常組和模型組大鼠各5只;斷頸處死后取其前列腺組織，計(jì)算前列腺指數(shù)。將前列腺組織固定包埋，作HE染色。結(jié)合前列腺指數(shù)與病理結(jié)果證明造模成功。將剩余模型組60只大鼠進(jìn)行隨機(jī)再分組，隨機(jī)分為3組:空白增生組(B組):20只;加味桂枝茯苓顆粒組（C組）:20只;非那雄胺組（D組）:20只，設(shè)定空

3、白對(duì)照組為A組。給予空白對(duì)照組與空白增生組大鼠生理鹽水2ml灌胃每天一次，加味桂枝茯苓顆粒組大鼠給予加味桂枝茯苓顆粒水液10g/kg/d，2ml/d;非那雄胺組大鼠給予非那雄胺1mg/kg/d灌胃，2ml/d，以上4組均連續(xù)灌胃30d。然后各組大鼠稱重后以斷頸法處死。取前列腺組織，用微量稱稱重、測(cè)量前列腺體積、計(jì)算前列腺指數(shù)、HE染色后在光鏡下觀察大鼠前列腺的組織的形態(tài)改變、采用電鏡觀察大鼠前列腺組織的細(xì)胞形態(tài)變化、采用免疫組織化學(xué)法檢

4、測(cè)大鼠前列腺組織中bcl-2、bax基因表達(dá)量。
　　結(jié)果:
　　(1)大鼠去勢(shì)后采取丙酸睪丸酮腹腔注射法成功復(fù)制前列腺增生模型。與正常組相比，其他各模型組大鼠前列腺腺體濕重、體積及前列腺指數(shù)均明顯增加(P＜0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　(2)光鏡下空白增生組大鼠前列腺腺體排列緊密，明顯呈結(jié)節(jié)狀增生，腺泡上皮細(xì)胞增厚為高柱狀，上皮呈復(fù)層或假?gòu)?fù)層排列，大部分腺上皮形成乳頭狀突起突向腺腔內(nèi)，腺腔小，腺腔內(nèi)分泌物增多，

5、腺體間可見(jiàn)小血管擴(kuò)張。加味桂枝茯苓顆粒組和非那雄胺組:部分腺腔變大，乳頭狀突起較增生對(duì)照組減少，上皮細(xì)胞單層柱狀與高柱狀兼有，多為單層柱狀，腺腔內(nèi)基本無(wú)分泌物，間質(zhì)偶見(jiàn)小血管擴(kuò)張。
　　(3)電鏡下空白增生組大鼠前列腺上皮細(xì)胞呈高柱狀，腺體上皮層數(shù)增多，核大小不一致，胞質(zhì)豐富，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈囊狀高度擴(kuò)張，囊內(nèi)充滿高密度蛋白顆粒;線粒體輕度腫脹（部分含有空泡），細(xì)胞表面有規(guī)則整齊的指狀突起，腔內(nèi)有中等密度分泌物，有些細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)致密圓形

6、分泌顆粒。加味桂枝茯苓顆粒組:前列腺上皮細(xì)胞呈短柱狀或扁平立方狀，細(xì)胞核不規(guī)則，濃縮，核致密度增高，異染色質(zhì)積聚，靠邊呈團(tuán)塊甚至月牙狀，常染色質(zhì)致密均質(zhì)化，胞質(zhì)有大量空泡;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)濃縮，線粒體空化（萎縮死亡），胞質(zhì)中分泌顆粒集中在細(xì)胞頂端，顆粒周圍有空化環(huán)，有顆粒形成頓錯(cuò)現(xiàn)象，表面指狀微絨毛極少，腔內(nèi)分泌物少。
　　(4)空白增生組bcl-2基因表達(dá)量顯著高于空白對(duì)照組(P＜0.01)，bax基因表達(dá)量明顯低于空白對(duì)照組(P＜0.0

7、1);加味桂枝茯苓顆粒組和非那雄胺組bcl-2基因表達(dá)量低于空白增生組(P＜0.01)，bax基因表達(dá)量明顯高于空白對(duì)照組(P＜0.01);加味桂枝茯苓顆粒組bcl-2、bax基因表達(dá)與非那雄胺組相似，無(wú)明顯差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論:
　　(1)加味桂枝茯苓顆粒可降低前列腺指數(shù)，縮小前列腺體積，可明顯抑制大鼠前列腺增生。
　　(2)加味桂枝茯苓顆粒通過(guò)改善腺體排列密度，減少乳頭狀結(jié)構(gòu)數(shù)量，抑制大鼠前列腺腺上皮的