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1、目的:本實(shí)驗(yàn)旨在通過復(fù)制大鼠前列腺增生模型,觀測(cè)加味桂枝茯苓顆粒對(duì)大鼠前列腺增生組織MVD計(jì)數(shù)及其組織結(jié)構(gòu)變化的影響,來評(píng)估前列腺增生組織新生血管密度及其組織結(jié)構(gòu)相關(guān)改變,加以探討具有補(bǔ)腎益氣活血化瘀之法的加味桂枝茯苓顆粒對(duì)大鼠前列腺增生的療效,為以后中醫(yī)藥治療BPH發(fā)展方向提供相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:健康雄性SD大鼠60只,7-8周齡,體重120-260g;由廣西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供(SCXK桂2009-0002)。
2、采用SPSS隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)將60只大鼠分為4組,正常對(duì)照組(A組);增生空白組(B組);加味桂枝茯苓顆粒組(C組);非那雄胺對(duì)照組(D組);每組15只。在無菌操作條件下,增生空白組(B組);加味桂枝茯苓顆粒組(C組);非那雄胺對(duì)照組(D組)分別給予切除睪丸去勢(shì)法,待第8天傷口愈合后繼續(xù)連續(xù)給予頸背部皮下注射溶于橄欖油的注射用丙酸睪丸酮(5mg·kg-1·d-1)25天,制成前列腺增生大鼠模型(通過正常對(duì)照組和空白增生組取樣比較,計(jì)算前
3、列腺增生指數(shù)證明造模成功)。25天后,正常對(duì)照組不施加任何給藥措施;增生空白組大鼠給予生理鹽水2ml灌胃每天一次,加味桂枝茯苓顆粒組大鼠給予加味桂枝茯苓顆粒浸泡液(2ml··d-1);非那雄胺組大鼠給予非那雄胺飽和溶液(2ml··d-1)灌胃,以上4組均連續(xù)灌胃28d,給藥期間每周稱體重1次以調(diào)整劑量。實(shí)驗(yàn)第60天,稱其重量,然后全部以斷頸法處死實(shí)驗(yàn)大鼠,剖腹仔細(xì)分離后摘除前列腺,取前列腺組織為所需實(shí)驗(yàn)樣品;用ACS-3A型電子計(jì)重稱稱
4、大鼠的體重,用AR2140電子分析天平用稱大鼠前列腺重量,以上單位均為:g,并計(jì)算前列腺指數(shù)(前列腺指數(shù)=前列腺濕重/體重×100%);置入裝有10%福爾馬林溶液的密閉容器里儲(chǔ)存?zhèn)溆茫薪M織病理學(xué)檢查;利用CD34的表達(dá)測(cè)量前列腺標(biāo)本微血管密度(MVD)并計(jì)數(shù);常規(guī)病理切片HE染色,光鏡下觀察前列腺間質(zhì)和腺體成分、腺上皮形態(tài),間質(zhì)情況等。
結(jié)果:(1)B組大鼠前列腺濕重、前列腺指數(shù)、MVD計(jì)數(shù)均明顯高于A組,表明造模成功;
5、(2)C組和D組與B組比較前列腺的兩項(xiàng)觀察指標(biāo)均明顯降低(P<0.05),即加味桂枝茯苓顆粒和非那雄胺對(duì)BPH的治療有著類似的療效。(3)HE染色片在光鏡下觀察表明:A組腺體排列清楚,上皮呈單層柱狀,腺腔無擴(kuò)張,腺體間可見明顯的間質(zhì);B組腺體排列明顯密集,小部分區(qū)域呈假復(fù)層,腺腔稍擴(kuò)張;C組腺體排列少密集,小部分區(qū)域呈假復(fù)層,腺腔稍擴(kuò)張;D組腺體排列稍密集,小部分區(qū)域形成低乳頭突向腔內(nèi),腺腔稍擴(kuò)張(4)B組MVD表達(dá)水平相對(duì)A組明顯提高
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