小檗堿干預(yù)大鼠糖尿病及葫蘆巴丸干預(yù)大鼠糖尿病性功能障礙的部分機(jī)制研究.pdf

1、第一部分從 LKB1-AMPK-TORC2信號(hào)通路探討小檗堿抑制肝臟糖異生治療大鼠糖尿病的機(jī)理研究
　　目的：
　　探討小檗堿對(duì)糖尿病大鼠肝臟糖異生的影響及其分子機(jī)制。
　　方法：
　　采用高脂飼料喂養(yǎng)和尾靜脈注射鏈脲佐菌素（STZ）建立糖尿病大鼠模型。大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、小檗堿組、二甲雙胍組、AICAR（AMPK激動(dòng)劑）組，給予相應(yīng)治療12周。檢測(cè)各組大鼠空腹血糖、空腹胰島素及血脂水平，Western

2、blot方法檢測(cè)大鼠肝組織絲氨酸蘇氨酸激酶Ⅱ（LKB1）、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、磷酸化 AMPK（p-AMPK）、磷酸化環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）輔激活物2（p-TORC2）、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶（PEPCK）和葡萄糖-6-磷酸酶（G-6-P）蛋白的表達(dá)。免疫組織化學(xué)方法觀察大鼠肝組織TORC2核定位情況。
　　結(jié)果：
　　經(jīng)小檗堿治療后，糖尿病大鼠血糖、血脂紊亂糾正，空腹胰島素水平降低，胰島素抵抗改善

3、；肝組織 LKB1、AMPK、p-AMPK和p-TORC2蛋白表達(dá)上調(diào)，TORC2多定位于細(xì)胞質(zhì)；此外，小檗堿治療后肝組織糖異生關(guān)鍵酶PEPCK和G-6-P的蛋白表達(dá)下調(diào)。
　　結(jié)論：
　　小檗堿可抑制糖尿病大鼠肝臟糖異生，其機(jī)制可能與上調(diào) LKB1-AMPK-TORC2信號(hào)通路相關(guān)分子表達(dá)有關(guān)。
　　第二部分從PKCα/NAPDH氧化酶信號(hào)通路探討葫蘆巴丸改善糖尿病大鼠睪丸組織氧化應(yīng)激損傷的機(jī)理研究
　　目的：

4、
　　探討葫蘆巴丸對(duì)糖尿病大鼠睪丸組織氧化應(yīng)激損傷的影響及其分子機(jī)制。
　　方法：
　　通過(guò)尾靜脈注射鏈脲佐菌素（STZ）及高脂飼料喂養(yǎng)建立2型糖尿病大鼠模型。用葫蘆巴丸治療12周，稱量大鼠體重及睪丸重量，腹主動(dòng)脈取血測(cè)定空腹血糖、空腹胰島素及血清總睪酮水平，檢測(cè)血清及睪丸組織氧化應(yīng)激指標(biāo)的變化，觀察睪丸組織的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)及睪丸間質(zhì)細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，檢測(cè)睪丸組織超氧化陰離子水平及細(xì)胞凋亡情況，實(shí)時(shí)熒光定量PCR及Weste

5、rn blot法檢測(cè)睪丸組織蛋白激酶Cα（PKCα）、磷酸化的蛋白激酶Cα（p-PKCα)及P47phox分子的mRNA及蛋白水平。
　　結(jié)果：
　　經(jīng)葫蘆巴丸治療后，糖尿病大鼠空腹血糖水平明顯降低，空腹胰島素及血清總睪酮水平明顯升高；與糖尿病大鼠血清及睪丸組織活性氧族的含量下降相比較，葫蘆巴丸治療后大鼠睪丸組織氧化應(yīng)激損傷明顯改善，同時(shí)，經(jīng)葫蘆巴丸治療后，糖尿病大鼠睪丸組織PKCα、p-PKCα及P47phox mRNA及