融合基因ETV6—NTRK3在血液腫瘤中的表達和臨床意義.pdf

1、本文研究了融合基因ETV6-NTRK3在血液系統(tǒng)腫瘤中的表達水平及其特點，并尋找其與免疫表型之間的關(guān)系，探討其引起血液系統(tǒng)腫瘤發(fā)生的可能分子生物學機制，同時初步探討該融合基因在臨床診斷、臨床治療及預(yù)后判斷等方面的價值。 材料與方法 收集山東大學齊魯醫(yī)院、山東省立醫(yī)院、濟南市中心醫(yī)院三家醫(yī)院2004年8月至2004年12月未治療的血液系統(tǒng)腫瘤患者的骨髓液共47例，和14例經(jīng)標準化療方案化療二個療程的AML-M2患者的骨髓液

2、(均采用EDTA抗凝)，使用Trizol抽提RNA，設(shè)計特異的PCR引物，采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法擴增特定的融合基因片段。3％普通瓊脂糖凝膠電泳后，在紫外光下分析RT-PCR擴增的產(chǎn)物。同時，對47例初治患者使用流式細胞術(shù)進行FCM免疫表型分析。 結(jié)果 (1)在紫外光下，47例血液系統(tǒng)腫瘤中，有2例表達ETV6-NTRK3融合基因，均為AML-M2a患者，其在M2中陽性率約為14％(2/14)。未能查到

3、NTRK3-ETV6基因和NTRK3基因。 (2)2例表達ETV6-NTRK3融合基因患者，使用標準劑量2-3個療程柔紅霉素+阿糖胞苷(DA)或米托蒽醌+阿糖胞苷(MA)方案，均為未緩解(NR)。復(fù)查ETV6-NTRK3融合基因均仍存在。提示表達該基因患者常規(guī)化療效果差，為難治性白血病。2例因身體狀態(tài)、經(jīng)濟等原因，未能再使用高劑量阿糖胞苷(HD-Arac)等繼續(xù)治療。但二例帶瘤生存時間均超過6個月。 (3)2例患者中位年

4、齡65歲，骨髓活檢，均提示有骨髓纖維化存在。 (4)流式細胞術(shù)FCM免疫表型分析：52歲男性患者(資料來自中國醫(yī)學科學院天津血液病研究所)：CD11770％，CD3356％，HLA-DR95％，CD1378％，CD3494％，CD2257％。78歲女性患者：CD1384.3％，CD3481.5％，CD3334.3％，CD11775.2％,HLA-DR73.6％。 結(jié)論 (1)約有14％AML-M2患者存在ETV6

5、-NTRK3融合基因t(12；15)(p12；q25)。均為M2a,為老齡患者，且伴有骨髓纖維化。 (2)目前的標準化療方案，對表達ETV6-NTRK3融合基因患者，效果不佳，為難治性白血病，患者預(yù)后不良。 (3)FCM免疫表型分析結(jié)果表明，表達ETV6-NTRK3融合基因的為急性髓細胞白血病M2型，表達CD13和CD33，且CD13表達強于CD33，不表達CD14，白血病細胞起源早，分化程度差，惡性度高。 (4