雌激素對(duì)去勢(shì)雌兔腰椎間盤髓核中IL-20和MMP-3表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:在建立雌激素缺乏腰椎間盤退變模型的基礎(chǔ)上,采用雌激素替代療法(ERT)作用于模型動(dòng)物,應(yīng)用western-blot和免疫組織化學(xué)方法等方法檢測(cè)IL-20和MMP-3在腰椎間盤髓核組織中的表達(dá)水平,并通過(guò)病理、核磁共振、組織電鏡等方法觀察椎間盤組織及超微結(jié)構(gòu)的改變,以初步探討雌激素對(duì)退變椎間盤髓核組織IL-20和MMP.3表達(dá)的影響及其作用機(jī)制。
　　 方法:將32只新西蘭大白兔隨機(jī)分為空白對(duì)照組(不做任何處理,A組)、實(shí)驗(yàn)

2、空白對(duì)照組(單純切除雙側(cè)卵巢,B組)、去勢(shì)后小劑量雌激素注射實(shí)驗(yàn)組(C組)、去勢(shì)后大劑量雌激素注射實(shí)驗(yàn)組(D組)各8只。動(dòng)物模型建立一周后,A組和B組隔日肌注生理鹽水2 mL,C組隔日肌注0.2 mg的苯甲酸雌二醇(2mg/ml)；D組隔日肌注1mg的苯甲酸雌二醇(2mg/ml)。3個(gè)月后對(duì)所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行腰椎的核磁共振檢測(cè),之后取腰椎間盤髓核組織,采用免疫組化法和western-blot方法檢測(cè)IL-20和MMP-3的表達(dá),并且進(jìn)行病理

3、、掃描電鏡檢測(cè)。
　　 結(jié)果:通過(guò)手術(shù)方法成功建立了模仿婦女絕經(jīng)后腰椎問(wèn)盤退變動(dòng)物模型,組織病理學(xué)結(jié)果退變的椎間盤組織中髓核細(xì)胞減少,出現(xiàn)不同程度的退變壞死細(xì)胞。透射電鏡顯示退變的椎間盤組織中髓核細(xì)胞數(shù)目減少,可見較多壞死殘跡,細(xì)胞突起減少或消失,細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器數(shù)目和糖原顆粒明顯減少。MRI提示B組椎間盤T2加權(quán)像信號(hào)減低,A組、C組和D組改變不明顯(P<0.05)。免疫組化和western-blot顯示A組、C組和D組中MMP-