糖皮質(zhì)激素通過(guò)調(diào)節(jié)髓核細(xì)胞內(nèi)AQP-3、MMP-3的表達(dá)干預(yù)早期椎間盤退變.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立兔椎間盤退變模型，在成功建立4周、8周動(dòng)物模型后，只在退變4周動(dòng)物模型椎間盤內(nèi)給予地塞米松注射液，在給地塞米松后3天、7天取標(biāo)本。觀察地塞米松是否能夠通過(guò)調(diào)解AQP-3、MMP-3表達(dá)來(lái)延緩椎間盤的早期退變。
　　 方法：首先將18只清潔健康6月齡新西蘭大白兔隨機(jī)分為A、B、C三組，建立兔椎間盤退變模型。直視下用16G穿刺針、穿刺針角度與中線約成45°，于纖維環(huán)前外側(cè)方平行軟骨終板刺入L2/3、L3/4、L4

2、/5、L5/6椎間盤纖維環(huán)組織，深度控制在5毫米，停留5秒。在成功建立模型后4周、8周，行兔椎間盤x線、核磁共振、組織病理學(xué)，確定椎間盤已經(jīng)發(fā)生退變。12只新西蘭大白兔（48個(gè)間盤）且將每只兔的L2/3、L3/4、L4/5、L5/6作為正常對(duì)照組、退變對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)A組、實(shí)驗(yàn)B組。退變對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)A組、實(shí)驗(yàn)B組分別給予0.9％氯化鈉注射液0.1ml、地塞米松注射液2.5mg/0.1ml、地塞米松注射液5mg/0.1ml。在給藥第3天、7天

3、后取髓核標(biāo)本，用MRI檢查腰椎間盤變化、用RT-PCR及免疫組織化學(xué)分別檢測(cè)AQP-3、MMP-3的表達(dá)情況。通過(guò)以上數(shù)據(jù)分析地塞米松注射液對(duì)早期退變椎間盤髓核內(nèi)AQP-3、MMP-3的影響。
　　 結(jié)果：用16號(hào)穿刺針造椎間盤退變動(dòng)物模型，在穿刺4周、8周后經(jīng)x線、核磁共振及組織病理學(xué)證實(shí)椎間盤已經(jīng)發(fā)生退變，并且隨著時(shí)間推移退變的程度在逐漸加重。在CR片上，在穿刺后4周、8周的椎間盤高度指數(shù)(DHI)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05

4、)；在核磁上，根據(jù)Pfirrmann分級(jí)法定量，在造模后4周、8周、12周各組之間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。造模成功后，在退變?cè)缙冢ㄍ俗?周動(dòng)物模型），經(jīng)纖維環(huán)穿刺給地塞米松后3天、7天，經(jīng)PCR檢測(cè)結(jié)果，MMP-3、AQP-3表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，但在免疫組織化學(xué)上，只有MMP-3有陽(yáng)性結(jié)果，且各組之間有差異；而AQP-3為陰性結(jié)果。
　　 結(jié)論：根據(jù)本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們得知用16G穿刺針經(jīng)纖維環(huán)穿刺4周后兔椎