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1、本試驗對產(chǎn)纖維素酶瘤胃厭氧真菌進行了分離純化,篩選到一株高酶活的厭氧真菌WA1,并對該菌株的酶學性質(zhì)、誘變及對麩皮的發(fā)酵效果進行了研究,結(jié)果如下:1.以篩選具有纖維素酶活性的瘤胃厭氧真菌為目的,采用的液體增菌、CMC-Na瓊脂厭氧培養(yǎng)的方法分離菌株,剛果紅染色,應用透明圈直徑與菌落直徑比值法(H:C)確定其纖維素酶相對活力。結(jié)果分離得到一株纖維素酶相對活力高的瘤胃厭氧真菌,經(jīng)鑒定為Orpinlmyces屬菌(O型屬菌)。此菌株粗酶液的濾
2、紙酶活(FPase),羧甲基纖維素酶活(CMCase)和水楊素酶活(salicinase)的最適反應pH分別為5.0,5.5和5.0;其pH穩(wěn)定范圍分別為4.0~7.0、4.0~7.5、4.5~5.5;最適溫度分別是55℃、50℃和55℃。水楊素酶的熱穩(wěn)定性最好,CMCase次之,濾紙酶活由于是三類纖維素酶組分的綜合表現(xiàn)而呈現(xiàn)S型曲線。最適條件下,濾紙酶活高達117U/ml。 2.以誘變篩選高產(chǎn)纖維素酶瘤胃厭氧真菌為目的,采用透
3、明圈法對經(jīng)紫外線、亞硝基胍復合誘變的瘤胃厭氧真菌進行初選,經(jīng)紫外線處理100s致死率為68%,經(jīng)亞硝基胍處理30min致死率為74%,以此作為適宜誘變時間,對瘤胃厭氧真菌孢子進行紫外線加亞硝基胍復合誘變。涂皿培養(yǎng)后得到10株H:C值較大的菌株,傳代10次后測CMC酶活進行復選。結(jié)果得到了7株高產(chǎn)纖維素酶瘤胃厭氧真菌,其中一株菌酶活OD值比出發(fā)菌株提高96%。 3.以研究瘤胃厭氧真菌在不同處理下對麩皮纖維素的發(fā)酵效果為目的,經(jīng)氨水
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