秦艽內(nèi)生真菌的誘變育種及其發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

1、QJl8是從秦艽根部分離得到的內(nèi)生真菌，由本實驗室分離保藏。QJl8能夠產(chǎn)生和其宿主相同的龍膽苦苷成分。 為了提高QJl8菌株產(chǎn)生龍膽苦苷的能力，本實驗選用多種誘變劑對該菌株進行了誘變育種。分別對QJl8進行了紫外線、He-Ne激光、亞硝酸、紫外加氯化鋰復合誘變、紫外加激光復合誘變和亞硝酸加激光復合誘變。通過紫外線誘變篩選出了QJl8-UV-23，He-Ne激光處理篩選出了QJl8-J-34，亞硝酸誘變篩選出QJl8-H-25，

2、紫外線加氯化鋰復合誘變得QJl8-UVL-32，它們的龍膽苦苷產(chǎn)量分別是出發(fā)菌株的1.252，1.170，1.091和1.287倍。另外，在紫外，激光和亞硝酸誘變中其最佳誘變時間分別為80 s，60 min和30 min。 分別以QJl8-UV-23和QJl8-H-25作為二次出發(fā)菌株進行了He-Ne激光誘變。經(jīng)過初篩和復篩得到紫外加激光復合誘變與亞硝酸加激光復合誘變這兩種方法的最佳突變株QJl8-UVJ-7和QJl8-HJ-1

3、6，其龍膽苦苷產(chǎn)量分別是原種的1.362和1.148倍。最終經(jīng)過比較確定QJl8-UVJ-7為本實驗產(chǎn)生的最佳突變株。通過以上理化誘變劑的誘變效果評價可以知道紫外線加He-Ne激光復合誘變是本實驗的誘變方法中最佳的誘變方式。 在選育高產(chǎn)菌株的基礎(chǔ)上，本實驗還利用改變培養(yǎng)條件的方法來提高其產(chǎn)量。通過比較不同培養(yǎng)基中菌絲生長和龍膽苦苷的產(chǎn)生情況，發(fā)現(xiàn)沙氏培養(yǎng)基和豆芽汁固體培養(yǎng)基最適合QJl8一LJvj-7的生長；豆芽汁液體培養(yǎng)基最有