超聲造影與血清蛋白質(zhì)譜對肝細(xì)胞癌微波消融后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的研究.pdf

1、目的：探討肝細(xì)胞癌超聲造影表現(xiàn)與微波消融后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的關(guān)系，篩選與肝細(xì)胞癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移相關(guān)的血清差異蛋白質(zhì)，尋求可能早期、無創(chuàng)且有效預(yù)測肝細(xì)胞癌微波消融治療后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的超聲造影與血清蛋白質(zhì)譜相結(jié)合的預(yù)測模型。 資料與方法： 本研究中所有患者均符合以下入組條件：經(jīng)穿刺活檢病理證實的肝細(xì)胞癌患者，病灶數(shù)目為單發(fā)，病灶最大直徑≦5cm，無血管侵犯及肝外轉(zhuǎn)移，肝功能Child-Pugh分級A～B級，無嚴(yán)重心、腦、腎、血管等疾病。

2、 (1)超聲造影研究組：對2006年3月～2007年11月行微波消融的65例肝細(xì)胞癌患者進(jìn)行前瞻性研究，微波消融治療前均行超聲造影檢查，繪制時間-強(qiáng)度曲線，對復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組進(jìn)行單因素及多因素分析，篩選出與肝細(xì)胞癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移有關(guān)的超聲造影參數(shù)。 (2)血清蛋白質(zhì)譜研究組：搜集56例肝細(xì)胞癌患者微波消融治療前及治療后的血清，采用CM10芯片為檢測介質(zhì)，經(jīng)SELDI-TOF-MS測定得到蛋白質(zhì)譜，通過Ciphergen Protei

3、nChip Software標(biāo)化，采用Biomarker Wizard軟件比較復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組間血清蛋白質(zhì)差異，利用Biomarker Pattens Software建立決策樹模型并進(jìn)行盲法驗證。對復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組微波治療前后的血清蛋白質(zhì)豐度差值進(jìn)行多因素分析，尋找與肝細(xì)胞癌微波消融治療后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移相關(guān)血清蛋白質(zhì)譜參數(shù)。 (3)對同時參加超聲造影和蛋白質(zhì)譜研究的50例患者的資料進(jìn)行分析，將肝細(xì)胞癌微波消融后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移相關(guān)的超聲造影

4、指標(biāo)與血清蛋白質(zhì)譜參數(shù)相結(jié)合，建立預(yù)測肝細(xì)胞癌微波消融后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型。 結(jié)果： (1)在本組研究病例中，肝細(xì)胞癌微波消融治療后復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組的性別構(gòu)成、年齡、病毒感染類型、術(shù)前AFP水平及腫瘤分化程度均無統(tǒng)計學(xué)差異。 (2)在復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組肝細(xì)胞癌患者治療前超聲造影參數(shù)中，單因素分析結(jié)果顯示兩組病灶時間-強(qiáng)度曲線在肝實質(zhì)達(dá)峰時間(p TTP)、腫瘤與肝實質(zhì)達(dá)峰時間差值(t-p TTP)以及腫瘤與

5、肝實質(zhì)峰值強(qiáng)度差值(t-p PI)三個參數(shù)上均具有顯著性差異。多因素進(jìn)一步分析結(jié)果顯示，t-p TTP與t-p PI是肝細(xì)胞癌微波消融后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的危險因素。 (3)微波消融治療前復(fù)發(fā)組與未復(fù)組患者血清中發(fā)現(xiàn)7個蛋白峰有顯著差異。M/Z為5170和7688的蛋白峰在復(fù)發(fā)組中呈高表達(dá)，而M/Z為1103、6449、6646、6858、7787的蛋白峰在復(fù)發(fā)組中呈低表達(dá)。40例肝癌微波消融治療前患者的血清蛋白質(zhì)譜建立的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移決策樹判

6、斷模型，由M/Z為6858、1103的2個蛋白峰組成，其靈敏性為96.30％，特異性為76.92％，對16例肝癌微波消融治療前患者血清蛋白質(zhì)譜進(jìn)行盲法驗證，該模型盲法驗證的靈敏性為50％，特異性為75％。 (4)微波消融治療后復(fù)發(fā)組與未復(fù)組患者血清中發(fā)現(xiàn)26個蛋白峰有顯著差異。M/Z為4426、6207、7161、9670、10028、12150、12222、24006、28928、29021、29233的蛋白峰在復(fù)發(fā)組中呈高表

7、達(dá)，而M/Z為3943、4100、4299、4657、5077、5348、6446、6644、6855、7788、7992、8586、8708、8794、19966的蛋白峰在復(fù)發(fā)組中呈低表達(dá)。40例肝癌微波消融治療后患者的血清蛋白質(zhì)譜建立的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移決策樹判斷模型，由M/Z為4100、4657的2個蛋白峰組成，其靈敏性為92.59％，特異性為84.62％。對16例肝癌微波消融治療后患者血清蛋白質(zhì)譜進(jìn)行盲法驗證，該模型盲法驗證的靈敏性為62

8、.5％，特異性為75％。 (5) Logistic回歸分析結(jié)果顯示，M/Z為28700、20628、10868、2140、17300、2067的蛋白峰先后進(jìn)入回歸方程。方程與實際資料的一致率達(dá)到95.8％。其中，M/Z為2140和17300的蛋白峰豐度差值是肝細(xì)胞癌微波消融后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的保護(hù)因素；而M/Z為2067、10868、20628、28700的蛋白峰豐度差值是肝細(xì)胞癌微波消融后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的危險因素。 (6)超聲造影與

9、血清蛋白質(zhì)譜相結(jié)合建立的人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型與實際數(shù)據(jù)吻合性良好，訓(xùn)練組的分類正確率達(dá)到100％；并且對肝細(xì)胞癌患者微波消融后復(fù)發(fā)情況具有較好的預(yù)測作用，預(yù)測組的分類正確率是83.3％，其中復(fù)發(fā)組的分類正確率是87.5％，未復(fù)發(fā)組的分類正確率是80％。 結(jié)論： (1)腫瘤與肝實質(zhì)達(dá)峰時間差值(t-p TTP)、腫瘤與肝實質(zhì)峰值強(qiáng)度差值(t-p PI)兩個參數(shù)是復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的危險因素，有望成為微波消融治療后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的超聲造影預(yù)測指

10、標(biāo)。 (2)由CM10芯片篩選出的微波消融治療術(shù)前及術(shù)后血清差異蛋白峰可能與肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移有關(guān)；決策樹模型對肝細(xì)胞癌患者微波消融治療的預(yù)后具有一定的預(yù)測作用。 (3)由M/Z為28700、20628、10868、2140、17300、2067的蛋白峰豐度差值建立的回歸方程能夠比較好地反映肝細(xì)胞癌患者微波消融治療的預(yù)后情況。 (4)超聲造影與血清蛋白質(zhì)譜相結(jié)合建立的人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型對肝細(xì)胞癌患者微波消融后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移