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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討蚯蚓纖溶酶(earthworm fibrinolytic enzyme,EFE)對(duì)人肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響。
方法:體外培養(yǎng)高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞株 HCCLM3,接種于裸鼠的頸背部皮下,四周后處死荷瘤鼠并剝離瘤體,將腫瘤切割為1mm×1mm×1mm大小的瘤塊,接種于新一批裸鼠的肝臟,建立裸鼠人肝癌高轉(zhuǎn)移原位移植模型。造模后七天將裸鼠隨機(jī)分為三個(gè)組,分別給予生理鹽水、低劑量EFE(800uku/kg.d)、高劑量EFE
2、(1600uku/kg.d)連續(xù)灌胃30天。給藥結(jié)束后七天處死裸鼠,打開(kāi)腹腔,肉眼直接觀察種植瘤的生長(zhǎng)情況、肝內(nèi)播散及腹腔種植情況,計(jì)算肝內(nèi)播散率及腹腔種植率;完整剝離種植瘤并稱(chēng)重;通過(guò)病理切片觀察肺臟中轉(zhuǎn)移的腫瘤灶數(shù)目;并通過(guò)RT-PCR及Western Blot方法檢測(cè)種植瘤中焦點(diǎn)粘附激酶(focus adhesionkinase,F(xiàn)AK)及β1整合素的表達(dá)。
結(jié)果:所有裸鼠均可見(jiàn)原位種植瘤的生長(zhǎng),造模成功率100%。
3、(1)生理鹽水對(duì)照組、低劑量EFE組、高劑量EFE組原位種植瘤瘤重分別為(1.57±0.05)g、(1.46±0.08)g、(1.36±0.11)g,高劑量組瘤重小于低劑量組,低劑量組瘤重小于生理鹽水對(duì)照組,三組比較差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05;(2)三組種植瘤肝內(nèi)播散率分別為100%、71.43%、14.29%,高劑量組肝內(nèi)播散率最低,生理鹽水對(duì)照組肝內(nèi)播散率最高,高劑量組與對(duì)照組相比差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05;(3)三組腹腔種
4、植率分別為85.71%、45.28%、14.29%,高劑量組種植率最低,而生理鹽水對(duì)照組最高,高劑量組與對(duì)照組相比差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05。(4)三組肺臟中腫瘤轉(zhuǎn)移灶數(shù)目平均為(65.00±4.40)個(gè)、(57.00±5.16)個(gè)、(49.86±7.01)個(gè),高劑量組肺臟轉(zhuǎn)移灶數(shù)目小于低劑量組,并進(jìn)一步小于生理鹽水對(duì)照組,三組間比較差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05。(5)低劑量組移植瘤中FAK及β1整合素在mRNA及蛋白水平的表達(dá)較
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