豬IGF1R、RasGRP1及InsR基因候選功能突變位點效應研究.pdf

1、我國作為第一養(yǎng)豬大國，豬肉類產品占我國肉類消費的65％左右。養(yǎng)豬業(yè)是我國畜牧業(yè)發(fā)展的重點，但目前我國養(yǎng)豬經濟效益還有待改善。我國地方豬與西方豬之間經濟性狀有著較大差異。西方豬由于長期的人工選擇使得豬的經濟性能不斷提高，而中國地方豬由于選擇的目的不同且選擇的強度較弱，目前在瘦肉率、生長速度等重要的經濟性狀上與西方豬還存在較大的差距。人工選擇的不同是中國地方豬與西方豬的經濟性狀產生較大差異的原因。本研究首先利用高通量測序數(shù)據(jù)對中西方豬種的選

2、擇信號差異進行了分析，篩選中西方豬種中受到強烈選擇的基因，結果顯示IGF1R、RasGRP1及InsR基因在中西方豬種中受到強烈選擇，然后對等位基因差異表達情況進行了研究并進行了位點保守性分析，預測出關鍵的功能調控位點進行后續(xù)的分子水平研究及群體研究，以期望找到對豬進行品種改良的關鍵分子標記。本研究得到的主要結果如下:
　　(1)通過選擇信號分析發(fā)現(xiàn)IGF1R、RasGRP1及InsR基因在中西方豬種中受到強烈選擇，并通過等位基因

3、差異表達研究和物種保守性分析找到3個很可能影響基因表達的候選功能位點。
　　(2)凝膠遷移實驗結果發(fā)現(xiàn)轉錄因子YY1能夠結合IGF1R基因-61K A/G多態(tài)位點，且對等位基因G有更強的結合能力。雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)活性檢測證明該位點能夠促進下游基因表達，且G等位基因發(fā)揮的作用更強。然后通過RNA干擾實驗發(fā)現(xiàn)轉錄因子YY1表達降低能夠抑制IGF1R的表達。
　　(3)凝膠遷移實驗結果顯示轉錄因子MyoD能夠結合IGF1R基

4、因Intron20 G/A多態(tài)位點，且對G等位基因有更強的結合能力。然后通過熒光定量PCR發(fā)現(xiàn)小鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞分化后IGF1R和MyoD的表達量都著極顯著的升高。
　　(4)對IGF1R基因-61KA/G多態(tài)與杜洛克×二花臉F2群體免疫及生長性狀進行關聯(lián)分析，結果表明該位點與33日齡嗜酸性粒細胞比率極顯著關聯(lián)，與80日齡體重顯著關聯(lián)，可以作為對豬生長及免疫性狀改良的候選分子標記。
　　(5)對IGF1R基因Intron20