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1、目的:探討殼寡糖預(yù)處理對(duì)大鼠腸缺血再灌注損傷(I/R)回腸組織NF-κB表達(dá)的影響并探討其可能的機(jī)制,為殼寡糖用于防治腸道缺血再灌注損傷提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:⑴采用成年健康雄性SD大鼠40只。⑵利用夾閉腸系膜上動(dòng)脈(SMA)的方法建立腸缺血再灌注損傷模型,依據(jù)夾閉及開(kāi)放再灌注的時(shí)間可分別建立輕度和重度缺血再灌注模型。⑶再灌注后處死大鼠,立即取出回腸組織大體觀察;部分組織用10%甲醛固定,常規(guī)石蠟切片,HE染色后光鏡下觀察;部分
2、組織立即置于-70℃冰箱保存留用于免疫組化法測(cè)定NF-κB蛋白的表達(dá)及實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)。
結(jié)果:①HE染色后光鏡下觀察可見(jiàn),假手術(shù)組(A組)大鼠腸絨毛完整,形態(tài)正常;重度缺血再灌注組(B組)可見(jiàn)絨毛結(jié)構(gòu)破壞,可見(jiàn)固有層毛細(xì)血管暴露、出血及炎性細(xì)胞浸潤(rùn);輕度缺血再灌注組(C組)病理改變較重度缺血再灌注組(B組)輕(P<0.01);殼寡糖預(yù)處理的重度及輕度缺血再灌注組(D組及E組)腸絨毛病理改變分別較重度及輕度缺血再灌注組(B組
3、和C組)明顯減輕(P值均<0.05)。②NF-κB蛋白表達(dá)情況:假手術(shù)組(A組)腸黏膜中僅見(jiàn)少量棕黃色顆粒(0.136±0.005),胞核未見(jiàn)NF-κB表達(dá);重度缺血再灌注組(B組)腸黏膜棕黃色顆粒增多(0.218±0.015),陽(yáng)性顆粒數(shù)和染色強(qiáng)度明顯高于假手術(shù)組(A組)(P<0.01),且有明顯的核轉(zhuǎn)位;輕度缺血再灌注組(C組)腸黏膜 NF-κB表達(dá)(0.170±0.003)較重度缺血再灌注組(B組)弱(P<0.01);殼寡糖預(yù)處理
4、的重度缺血再灌注組(D組)(0.181±0.010)和殼寡糖預(yù)處理的輕度缺血再灌注組(E組)(0.156±0.004)的回腸黏膜NF-κB表達(dá)分別弱于重度缺血再灌注組(B組)和輕度缺血再灌注組(C組)(P值均<0.05)。③NF-κB mRNA表達(dá)情況:重度缺血再灌注組(B組)(0.702±0.053)和輕度缺血再灌注組(C組)(0.547±0.053)NF-κB mRNA表達(dá)值均高于假手術(shù)組(A組)(0.371±0.052)(P值均<
5、0.01);殼寡糖預(yù)處理的重度缺血再灌注組(D組)(0.605±0.052)和殼寡糖預(yù)處理的輕度缺血再灌注組(E組)(0.467±0.111)NF-κB mRNA表達(dá)值均低于重度缺血再灌注組(B組)和輕度缺血再灌注組(C組)(P值均<0.01)。
結(jié)論:⑴與對(duì)照組比較,殼寡糖預(yù)處理組腸道粘膜損傷明顯減輕,提示殼寡糖對(duì)缺血再灌注腸黏膜有保護(hù)作用。⑵殼寡糖預(yù)處理組NF-κB mRNA及NF-κB蛋白表達(dá)水平均低,提示殼寡糖對(duì)大鼠回
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