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1、目的:觀察熊果酸(Ursolic Acid UA)對(duì)肝癌細(xì)胞株BEL-7404轉(zhuǎn)移侵襲能力的作用及其對(duì)細(xì)胞內(nèi)相關(guān)基因MMP-2、TIMP-2mRNA及蛋白表達(dá)水平的影響,探討UA抗肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)分子機(jī)制。方法:據(jù)前期MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果選用A組(含UA50 μmol/L)、B組(含DDP10μg/ml)和C組(空白對(duì)照)對(duì)BEL-7404細(xì)胞進(jìn)行處理,用細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)及Transwell小室法檢測(cè)細(xì)胞的遷移速率及侵襲穿膜細(xì)胞數(shù),RT-PCR
2、及Western Blot法檢測(cè)細(xì)胞中MMP-2、TIMP-2mRNA及蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果:UA對(duì)BEL-7404細(xì)胞作用48h后,A、B兩組細(xì)胞的遷移速率(35.2±8.7μm/h、30.5±8.6μm/h)及侵襲穿膜細(xì)胞數(shù)(21.2±5.3個(gè)、20.2±5.7個(gè))、MMP-2mRNA(0.24±0.06、0.23±0.05)及蛋白(0.21±0.01、0.24±0.04)表達(dá)水平均較C組(75.6±8.7μm/h、54.8±7.8
3、個(gè)、0.46±0.11、0.42±0.06)明顯降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),而TIMP-2 mRNA(0.87±0.05、0.83±0.06)及蛋白(0.98±0.06、0.95±0.09)表達(dá)水平均比C組(0.31±0.02、0.59±0.02)高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);A、B兩組間細(xì)胞的遷移速率、侵襲穿膜細(xì)胞數(shù)、MMP-2和TIMP-2mRNA及蛋白表達(dá)水平的比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論:
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