吡那地爾超極化停搏對(duì)成年鼠心肌保護(hù)作用信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的初探.pdf

1、研究背景：我們前期大量實(shí)驗(yàn)研究證明：鉀通道開(kāi)放劑(PCOs)所產(chǎn)生的超極化停搏心肌保護(hù)效果優(yōu)于傳統(tǒng)高鉀去極化停搏，其保護(hù)作用主要表現(xiàn)在：改善缺血/再灌注心肌收縮功能；降低缺血/再灌注心肌高能磷酸化合物的消耗；減少細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載，減輕氧自由基損傷，保護(hù)線粒體結(jié)構(gòu)和功能；減少缺血再灌注心肌細(xì)胞壞死和調(diào)亡，使缺血再灌注心肌的結(jié)構(gòu)保存良好。以吡那地爾為代表的PCOs具有良好的臨床運(yùn)用前景，而明確其保護(hù)機(jī)制將為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)就

2、吡那地爾超極化停搏對(duì)成年大鼠心肌保護(hù)作用及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制進(jìn)行了研究。 目的：研究鉀通道開(kāi)放劑吡那地爾超極化停搏對(duì)離體大鼠心臟缺血再灌注損傷的保護(hù)效應(yīng)，觀察各組心肌心功能(HR、LVDP、LVSP、dp/dtmax、CF)、PKC-ε、磷酸化p38MAPK、非磷酸化p38MAPK和HSP70的表達(dá)情況，探討吡那地爾超極化停搏大鼠心臟的保護(hù)作用機(jī)制與胞膜鉀通道、線粒體鉀通道、PKC-ε、p38MAPK和HSP70的相關(guān)關(guān)系。

3、方法：采用離體大鼠心臟Langendorff灌注模型，64只大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(C)、St.Thomas組(S)、吡那地爾組(P)、5-HD組(Hd)、HMR1098組(Hmr)、5-HD+HMR1098組(Hd+Hmr)、chelerythrine組(Che)、SB203580組(Sb)，共8組，每組8只。K-H液平衡灌注15min后視分組情況給予自然停搏、St.Thomas去極化停搏或吡那地爾超極化停搏。5-HD、HMR1098、5

4、-HD+HMR1098、Chelerythrine、SB203580于吡那地爾超極化停搏前5min給予，其余方法同P組。全心缺血40min，復(fù)灌30min。測(cè)定平衡10min末、復(fù)灌20min兩時(shí)間點(diǎn)心功能(CF、HR、LVSP、LVDP、dp/dtmax)，采用免疫組化法測(cè)定缺血復(fù)灌心肌PKC-ε和HSP70表達(dá)量，WesternBlot法測(cè)定磷酸化p38MAPK和非磷酸化p38MAPK的含量。 結(jié)果：1.心功能指標(biāo)：各組缺血

5、前心功能無(wú)差異，缺血再灌注后P組心功能(CF、HR、LVDP、LVSP、dp/dtmax)恢復(fù)優(yōu)于其他各組(P＜0.05)。S組心功能指標(biāo)優(yōu)于Hmr組、Hd組、Hd+Hmr組、Che組、Sb組、C組。Hmr組優(yōu)于Hd組、Hd+Hmr組、Che組、Sb組、C組。Hd組優(yōu)于Hd+Hmr組、Che組、Sb組、C組。Hd+Hmr組、Che組、Sb組、C組組間無(wú)差異。 2.PKC-ε指標(biāo)：PKC-ε的表達(dá)，P組較其他各組高，其膜表達(dá)增加，

6、具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。P組較S組表達(dá)豐富。P組較Hmr組、Hd組、Hd+Hmr組、Che組、Sb組及C組豐富。S組較Hmr組、Hd組、Hd+Hmr組、Che組、Sb組、C組表達(dá)豐富。Hmr組較Hd組、Hd+Hmr組、Che組、Sb組、C組表達(dá)豐富。Hd組較Hd+Hmr組、Che組、Sb組、C組表達(dá)豐富。Che組較Hd+Hmr組、Sb組、C組表達(dá)低。Hd+Hmr組、Sb組、C組組間無(wú)差異。 3.p38MAPK指標(biāo)：磷酸化

7、p38MAPK，P組較其他各組高，非磷酸化p38MAPK，P組較其他各組低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。磷酸化p38MAPKP組較S組高而非磷酸化p38MAPK較低。S組較Hmr組、Hd組、Hd+Hmr組、Che組、Sb組、C組磷酸化p38MAPK表達(dá)豐富而非磷酸化p38MAPK較低。Hmr組較Hd組、Hd+Hmr組、Che組、Sb組、C組磷酸化p38MAPK表達(dá)豐富而非磷酸較低。Hd組較Hd+Hmr組、Che組、Sb組、C組之磷酸

8、化p38MAPK表達(dá)豐富而非磷酸較低。Hd+Hmr組、Che組、C組組間磷酸化p38MAPK和非磷酸化p38MAPK比較無(wú)差異。Sb組較其它各組磷酸化p38MAPK最低而非磷酸化p38MAPK最高。 4.HSP70指標(biāo)：HSP70的表達(dá)，P組較其他各組高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。P組較S組HSP70表達(dá)含量高。P組較Hmr組、Hd組、Hd+Hmr組、Che組、Sb組、C組HSP70表達(dá)含量高。S組較Hmr組、Hd組、Hd