金釵石斛試管開花研究.pdf

1、利用組織培養(yǎng)的方法,研究金釵石斛(Dendrobium nobile Lindl)的試管開花,縮短營養(yǎng)生長向生殖生長轉(zhuǎn)變的時(shí)間,探討花芽分化規(guī)律在理論上和應(yīng)用上都具有重要的意義.該文研究了PP<,333>、ABA、TDZ、BA、含氮量和糖濃度等因素對(duì)金釵石斛組培苗花芽發(fā)生和花發(fā)育的影響.通過篩選,誘導(dǎo)金釵石斛花芽形成效果最好的培養(yǎng)方法是:以1/2MS附加蔗糖30g/L,瓊脂9g/L,活性炭0.5g/L為基本培養(yǎng)基(pH5.6~5.8),

2、將組培苗在加有PP<,333>0.5mg/L+ABA0.5mg/L的培喬基上預(yù)培養(yǎng)35d后,再轉(zhuǎn)入到附加TDZ0.1mg/L+PP<,333>1.0mg/L的培養(yǎng)基中.150d內(nèi)統(tǒng)計(jì)的花芽形成率高達(dá)62.2％.根的修剪對(duì)花芽形成有顯著影響,這種誘導(dǎo)提早開花的現(xiàn)象通常發(fā)生在進(jìn)行了根修剪的情況中,開花的植株多是接種的小苗基部萌發(fā)的幼芽形成的新植株,在其頂端形成單花或具有2~4朵小花的花序.以MS+NAA0.5mg/L為基本培養(yǎng)基,附加不同濃

3、度的PP<,333>,可促使金釵石斛幼苗茁壯生長.在壯苗培養(yǎng)過程中也有花芽形成,但形成率較低.用經(jīng)過壯苗培養(yǎng)的材料進(jìn)行處理,在預(yù)處理?xiàng)l件及成花誘導(dǎo)條件不變的情況下,花芽形成率和正?；ǖ谋嚷示黠@增加,分別達(dá)到80.0％和58.3％.以誘導(dǎo)花芽形成效果最佳的配方處理的金釵石斛小苗為材料,通過石蠟切片,觀察了金釵石斛花芽分化初期形態(tài)發(fā)育過程,整個(gè)過程大致分為8個(gè)時(shí)期.處理20d時(shí)花芽仍未分化,30d時(shí)將分化,40d左右逐漸分化出花原基,50

4、~80d可觀察到萼片原基、花瓣原基、合蕊柱.以誘導(dǎo)花芽形成效果最佳的培養(yǎng)基作為處理組,同時(shí)設(shè)置一組對(duì)照.通過SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行蛋白組分的分析.30d的對(duì)照組中出現(xiàn)了兩個(gè)特異性蛋白,分子量為36KD左右和29KD左右.75d的對(duì)照組中出現(xiàn)了一個(gè)分子量約12KD的特異性蛋白.90d對(duì)照組中的特異性蛋白分子量約41KD;處理組中三個(gè)特異性蛋白分子量分別為54KD左右、13KD左右和12KD左右.另外,105d的處理組中也出現(xiàn)了三個(gè)