始興石斛的快速繁殖體系建立及試管開花研究.pdf

1、始興石斛(DendrobiumshixingenseZ.L.Chen,S.J.ZengetJ.Duan)于2010年發(fā)現(xiàn)于廣東北部始興縣,現(xiàn)僅發(fā)現(xiàn)廣東及江西交界的少數(shù)地區(qū)有分布,適生海拔約400-600m。近年來,野生石斛資源遭到掠奪式采集,已經(jīng)面臨瀕危滅絕的境況。
　　 本研究以其種子為外植體,附加不同濃度的6-BA、IBA、NAA、KT和AC等篩選出種子無菌萌發(fā)、原球莖增重、原球莖分化、原球莖誘導(dǎo)、叢生芽增殖和幼苗生根的適宜

2、培養(yǎng)基;比較不同的煉苗處理方式對移栽成活率的影響;測定原球莖增重培養(yǎng)的動力學(xué)參數(shù)指標(biāo)。以始興石斛(4個月苗齡)成株為材料,研究了6-BA、TDZ、蔗糖、光周期和溫度對誘導(dǎo)試管成花的影響作用,結(jié)果表明:
　　 適合種子萌發(fā)的培養(yǎng)基是MS+6-BA1.5mg·L-1+NAA0.6mg·L-1+AC(活性炭)0.1％,其萌發(fā)率可達(dá)100%;適合原球莖增重的培養(yǎng)基是MS+6-BA0.8mg·L-1+NAA0.3mg·L-1+蔗糖4.5%

3、,其增殖系數(shù)為7.8倍;適合分化的培養(yǎng)基是MS+6-BA2.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+AC0.03%,其分化率為92%;適合原球莖誘導(dǎo)的培養(yǎng)基是1/2:MS+KT0.1mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,誘導(dǎo)率為41.67%;適合叢生芽增殖的培養(yǎng)基是1/2MS+6-BA0.7mg·L-1+NAA0.8mg·L-1+KT1.0mg·L-1,其增殖系數(shù)可達(dá)5.25倍;適合生根的培養(yǎng)基是1/2MS+IBA0.5mg·L-1

4、+AC0.05%,生根率為95.3%;適合的移栽基質(zhì)及配比為樹皮:苔蘚:火山石=2:1:1,成活率可達(dá)90.3%以上。
　　 原球莖增重培養(yǎng)的動力學(xué)參數(shù)指標(biāo):原球莖的生長可分為0～4d延滯期;4～18d對數(shù)生長期;18～22d穩(wěn)定期;22～24為衰亡期。在培養(yǎng)周期內(nèi),第6d時葡萄糖含量迅速降低為9.43g·L-1;果糖濃度在前6d逐漸上升,后期消耗較快;蔗糖在原球莖生長過程中呈緩慢下降的趨勢;磷酸鹽濃度在0～6d期間迅速下降,然

5、后有一個回升的過程,在14d以后磷含量基本保持不變直至穩(wěn)定下來。銨態(tài)氮濃度在培養(yǎng)的前12d迅速降低,下降至112mg·L-1,在12～18d基本保持不變,此后持續(xù)下降至87mg·L-1;硝酸根離子的濃度隨培養(yǎng)時間呈逐步下降的趨勢。在培養(yǎng)的前8d時間里,pH由5.5下降到3.6,隨后培養(yǎng)基的pH開始緩慢上升,到培養(yǎng)的第18d時pH達(dá)到4.5并穩(wěn)定下來。
　　 6-BA濃度對其試管開花的作用不明顯,花芽誘導(dǎo)率最高僅為6.67%;TD